欧美日韩乱一区二区三区,亚洲欧美一区二区日韩高清在线,97青青草视频免费观看

NEWS新聞資訊

公司動(dòng)態(tài) 促銷活動(dòng)

boutique精品展示

SeraCare?KPL高性價(jià)比WB底物

西美杰代理的LGC·SeraCare·KPL(以下簡(jiǎn)稱KPL)是國(guó)際知名親和純化商業(yè)二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,具備逾40年的產(chǎn)品研發(fā)與生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),并已通過ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證。其產(chǎn)品批間一致性高、質(zhì)量穩(wěn)定可靠,在診斷試劑行業(yè)中獲得廣泛認(rèn)可與信賴。KPL旗下產(chǎn)品線包含高性價(jià)比二抗、底物顯色試劑及免疫輔助試劑等,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)研究、診斷試劑開發(fā)及臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。KPL品牌高性價(jià)比的底物與通用型試劑可廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、免疫印跡(Western Blot, WB)、免疫組化(IHC)以及酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(ELISpot)等多種實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。本文將重點(diǎn)介紹KPL品牌中適用于Western blotting技術(shù)的高性價(jià)比底物系列產(chǎn)品。Western blotting技術(shù)Western Blot技術(shù)是一種用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)的免疫印跡技術(shù),是免疫檢測(cè)領(lǐng)域中最流行的方法之一。它基于蛋白質(zhì)的分子量分離和特異性抗體識(shí)別,通過電泳分離蛋白質(zhì)后,將其轉(zhuǎn)移到固相膜上,再利用特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)。在Western Blot實(shí)驗(yàn)中,信號(hào)檢測(cè)是關(guān)鍵步驟,用于可視化和定量目標(biāo)蛋白。過去,比色檢測(cè)和低靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測(cè)推動(dòng)了研究的擴(kuò)展。然而,隨著對(duì)檢測(cè)靈敏度要求的不斷提高以及成像分析系統(tǒng)的進(jìn)步,化學(xué)發(fā)光分子設(shè)計(jì)也取得了顯著發(fā)展,實(shí)現(xiàn)了更高靈敏度的檢測(cè)能力。在Western Blot實(shí)驗(yàn)體系中,高質(zhì)量底物對(duì)實(shí)現(xiàn)高靈敏度與低背景值至關(guān)重要。KPL提供的生色底物與化學(xué)發(fā)光底物,以其卓越的性能和可靠的質(zhì)量,成為Western Blot實(shí)驗(yàn)體系中的核心組成部分,助力科研人員獲得更理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。化學(xué)發(fā)光底物系列產(chǎn)品化學(xué)發(fā)光法是檢測(cè)微量蛋白質(zhì)的最佳選擇,其原理是化學(xué)發(fā)光底物在被抗體標(biāo)記的酶(如HRP或AP)催化時(shí)發(fā)光。KPL的LumiGLO®系列是基于魯米諾的HRP底物,提供從常規(guī)到超高靈敏度的完整檢測(cè)方案;KPL的PhosphaGLO?系列則是基于二氧雜環(huán)丁烷的AP底物,兼具高靈敏與操作靈活性。兩者均適用于Western Blot及ELISA應(yīng)用。LumiGLO Reserve? &LumiGLO® 化學(xué)發(fā)光底物 LumiGLO Reserve?和 LumiGLO®均是基于魯米諾的化學(xué)發(fā)光底物,專為高靈敏度檢測(cè)設(shè)計(jì)。LumiGLO Reserve?靈敏度較LumiGLO®及其他同類產(chǎn)品提升超過20倍,尤其適用于低豐度蛋白或珍貴樣本的檢測(cè);其發(fā)光信號(hào)可持續(xù)4至8小時(shí),最強(qiáng)信號(hào)出現(xiàn)在反應(yīng)后第一小時(shí)內(nèi),發(fā)光強(qiáng)度顯著,更易被化學(xué)發(fā)光成像儀清晰捕捉。該產(chǎn)品為穩(wěn)定的雙組分溶液,按1:2比例配制即用,并提供三種規(guī)格及配套濃縮型KPL洗滌液,進(jìn)一步提升實(shí)驗(yàn)便利性。而 LumiGLO®同樣以雙組分形式提供,使用時(shí)等體積混合即可,操作簡(jiǎn)便,在Western Blot及ELISA檢測(cè)中比顯色底物更靈敏,背景低,與HRP反應(yīng)后5分鐘內(nèi)達(dá)到最大發(fā)光強(qiáng)度,信號(hào)可持續(xù)1至2小時(shí),并支持免疫印跡膜的多次剝離與重新探測(cè),線性動(dòng)態(tài)范圍優(yōu)于多數(shù)同類產(chǎn)品,廣泛適用于多種蛋白檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。兩款產(chǎn)品的檢測(cè)結(jié)果均可通過X光膠片或化學(xué)發(fā)光成像儀進(jìn)行永久記錄。品名貨號(hào)規(guī)格反應(yīng)酶信號(hào)類型靈敏度LumiGLO Reserve? ChemiluminescentSubstrate5430-0050 5430-0051 5430-0049 600 cm21000 cm22400 cm2HRP化學(xué)發(fā)光10-15-10-12LumiGLO®Chemiluminescent Substrate5430-00425430-00405430-004160 mL240 mL720 mLHRP化學(xué)發(fā)光10-12PhosphaGLO Reserve?AP&PhosphaGLO? 化學(xué)發(fā)光底物PhosphaGLO Reserve?與 PhosphaGLO?均為基于二氧雜環(huán)丁烷的即用型單組分化學(xué)發(fā)光底物,專為堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記系統(tǒng)優(yōu)化設(shè)計(jì)。PhosphaGLO Reserve?具備飛克級(jí)超高靈敏度,可精準(zhǔn)檢測(cè)低豐度蛋白,顯著減少珍貴樣本用量,并提供卓越的信號(hào)強(qiáng)度和長(zhǎng)達(dá)五天的穩(wěn)定發(fā)光,支持多次曝光或重復(fù)讀數(shù),其信號(hào)強(qiáng)度顯著優(yōu)于傳統(tǒng)顯色底物及其他化學(xué)發(fā)光產(chǎn)品;而PhosphaGLO?可穩(wěn)定檢測(cè)皮克級(jí)別蛋白,無需額外封閉步驟,操作簡(jiǎn)便,發(fā)光信號(hào)可持續(xù)長(zhǎng)達(dá)五天,并在4°C條件下穩(wěn)定保存兩年。兩款產(chǎn)品均兼容 X 光膠片和化學(xué)發(fā)光成像儀等多種檢測(cè)設(shè)備,為高靈敏度蛋白質(zhì)檢測(cè)提供靈活、可靠的解決方案。品名貨號(hào)規(guī)格反應(yīng)酶信號(hào)類型靈敏度PhosphaGLO Reserve? AP Substrate5430-00525430-005330 mL100 mLAP化學(xué)發(fā)光10-15PhosphaGLO? AP Substrate5430-00545430-005530 mL100 mLAP化學(xué)發(fā)光10-12顯色底物系列產(chǎn)品顯色底物利用酶促反應(yīng)產(chǎn)生可見的最終產(chǎn)物,適用于目標(biāo)蛋白含量較高的檢測(cè)場(chǎng)景。這類底物的優(yōu)勢(shì)在于其結(jié)果可以直接在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上觀察,并通過拍照長(zhǎng)期保存,無需暗室或?qū)I(yè)成像系統(tǒng)。KPL提供的顯色底物針對(duì)HRP(辣根過氧化物酶)和AP(堿性磷酸酶)檢測(cè)進(jìn)行了優(yōu)化,具備多種靈敏度級(jí)別,確保高穩(wěn)定性和批間一致性。TMB 1 Membrane Peroxidase Substrate底物系列TMB膜過氧化物酶底物是一種高靈敏度的顯色底物,專為辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)設(shè)計(jì),能夠在HRP標(biāo)記位點(diǎn)形成清晰的深藍(lán)色沉淀。這種底物提供了兩種形式:TMB 1-Component Membrane Peroxidase Substrate單組分即用型,使用方便,無需額外配制;以及TMB Membrane Peroxidase Substrate System(3-C)三組分系統(tǒng),通過省略增強(qiáng)劑,可調(diào)整為適用于ELISA的可溶性底物系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)一物多用。這兩種形式都具有出色的靈敏度和應(yīng)用靈活性,適用于Western Blot、Dot Blot以及ELISA等多種檢測(cè)方法。其高靈敏度、操作簡(jiǎn)便、多功能性和高穩(wěn)定性,使其成為膜檢測(cè)中最靈敏的顯色解決方案之一,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和重復(fù)性。品名貨號(hào)規(guī)格反應(yīng)酶信號(hào)類型靈敏度TMB 1-ComponentMembrane Peroxidase Substrate5420-00295420-00275420-0028100 mL200 mL1000 mLHRP顯色10-12TMB MembranePeroxidase Substrate System(3-C)5420-0025440 mLHRP顯色10-12BCIP/NBT Phosphatase Substrate 底物系列BCIP/NBT磷酸酶底物是專為與堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的偶聯(lián)物配合使用的高效顯色檢測(cè)底物,可產(chǎn)生清晰的紫色沉淀?xiàng)l帶,同時(shí)保持極低的背景染色。該底物提供兩種形式:經(jīng)典的三組分系統(tǒng)BCIP/NBT Phosphatase Substrate System(3-C)和更便捷的單組分BCIP/NBT 1-Component Phosphatase Substrate即用型溶液。兩種形式均適用于蛋白印跡和ELISpot實(shí)驗(yàn),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求,確保檢測(cè)結(jié)果的高靈敏度和可靠性。品名貨號(hào)規(guī)格反應(yīng)酶信號(hào)類型靈敏度BCIP/NBT1-Component Phosphatase Substrate5420-0038 5420-00335420-00365420-0037100 mL6x100 mL1000 mL5000 mLAP顯色10-12-10-9BCIP/NBTPhosphatase Substrate System(3-C)5420-0030300 mLAP顯色10-12-10-9關(guān)于LGC·Seracare·KPL品牌KPL(Kinetic Plasmonics Laboratories)是一家在生物科學(xué)領(lǐng)域具有深厚歷史和卓越聲譽(yù)的公司。作為世界上較早實(shí)現(xiàn)親和純化二抗商業(yè)化的生物公司之一,KPL憑借其在該領(lǐng)域的先驅(qū)地位奠定了堅(jiān)實(shí)的發(fā)展基礎(chǔ)。此外,KPL也是世界上較大的二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,擁有近40年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn),積累了豐富的專業(yè)知識(shí)和技術(shù)實(shí)力。公司通過ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證,確保所有產(chǎn)品的批間差小,品質(zhì)可靠。KPL的產(chǎn)品以高純度、高靈敏度和高信噪比(信號(hào)強(qiáng)、背景低)為特點(diǎn),深受科研人員和診斷企業(yè)的信賴。2013年,KPL被體外診斷試劑供應(yīng)商SeraCare收購(gòu),進(jìn)一步鞏固了其在行業(yè)內(nèi)的領(lǐng)先地位。SeraCare成立于1984年,是全球體外診斷制造商和臨床實(shí)驗(yàn)室的主要合作伙伴,2018年成為L(zhǎng)GC集團(tuán)的一部分。北京西美杰作為L(zhǎng)GC·Seracare·KPL品牌的中國(guó)區(qū)總代理,致力于KPL優(yōu)秀產(chǎn)品的中國(guó)推廣,為國(guó)內(nèi)的廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù)。 更多>

星品推薦 | AppliChem IPEC級(jí)別甘油

甘油,一種有機(jī)化合物,化學(xué)式為C3H8O3,是一種簡(jiǎn)單的多元醇化合物。它是一種無色、透明、粘稠的液體,具有甜味和極強(qiáng)的吸濕性。甘油作為保濕劑、溶劑和潤(rùn)滑劑,廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。在醫(yī)藥行業(yè)中,高純度的甘油(如IPEC級(jí))還可用于制作藥品和疫苗。 IPEC級(jí)甘油是指按照《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》(Good Manufacturing Practice)生產(chǎn)的藥用級(jí)別甘油。這種甘油經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制和生產(chǎn)流程,確保其純度和安全性,以滿足藥品生產(chǎn)的高標(biāo)準(zhǔn)要求,同時(shí)具有以下特點(diǎn): 穩(wěn)定性好:甘油具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,不會(huì)輕易分解或變質(zhì),這對(duì)于藥品的長(zhǎng)期保存和使用至關(guān)重要。 安全性強(qiáng):IPEC甘油生產(chǎn)過程符合嚴(yán)格的藥品生產(chǎn)規(guī)范,產(chǎn)品質(zhì)量可靠,對(duì)人體安全無害。 超高純度:雜質(zhì)極少,能夠保證在制藥過程中不會(huì)引入額外的雜質(zhì),從而保證藥品的質(zhì)量和安全性。 嚴(yán)格管控:生產(chǎn)全過程符合GMP標(biāo)準(zhǔn),確保批次間質(zhì)量一致性和可追溯性。 結(jié)合甘油自身的特性和IPEC級(jí)別產(chǎn)品的優(yōu)勢(shì),IPEC級(jí)別甘油在在生物制藥中得到了廣泛的應(yīng)用。 冷凍保護(hù):在低溫冷凍過程中,甘油能滲透進(jìn)入細(xì)胞,降低細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,防止冰晶刺破細(xì)胞膜,從而保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性。 藥物穩(wěn)定:甘油能夠防止藥物成分的氧化和分解,延長(zhǎng)藥品的保質(zhì)期。 制劑配方:由于甘油良好的溶解性和穩(wěn)定性,能夠使藥物成分更好地溶解和分散,從而提高藥物的生物利用度和療效。因此甘油可以作為溶劑或保濕劑用于單克隆抗體、蛋白質(zhì)藥物的制劑配方。 培養(yǎng)添加劑:甘油可以在在無血清培養(yǎng)基中提供細(xì)胞保護(hù)作用,提高細(xì)胞存活率。 所以,IPEC甘油是生物制藥行業(yè)不可或缺的高標(biāo)準(zhǔn)原料,其嚴(yán)格的品質(zhì)要求和卓越的功能特性,確保了藥品生產(chǎn)的安全性和有效性。PanReac AppliChem作為一家品質(zhì)卓越的歐洲生物化學(xué)試劑與制藥原輔料生產(chǎn)商,擁有IPEC級(jí)別甘油。品名 貨號(hào) CAS 規(guī)格 Glycerol (Ph. Eur, BP,USP) IPEC grade 甘油 631339 56-81-5 25L AppliChem IPEC級(jí)別甘油可提供250ml規(guī)格免費(fèi)樣品,歡迎聯(lián)系西美杰申請(qǐng)測(cè)試! 西美杰是PanReac AppliChem中國(guó)總代理,為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。如對(duì)產(chǎn)品感興趣歡迎撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www_xmjsci_com.banxiacc.com了解更多信息。 更多>

基于新型納米纖維的LentiHERO在LVV和HSV純化工藝中的應(yīng)用

溶瘤病毒如單純皰疹病毒(HSV)和痘苗病毒因能在腫瘤細(xì)胞中選擇性復(fù)制,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞溶解和觸發(fā)免疫應(yīng)答的能力,而在癌癥治療領(lǐng)域中逐漸受到重視。同樣,慢病毒載體(LVV),如伽利略病毒(GalV)和VSV-G能夠通過實(shí)現(xiàn)細(xì)胞類型特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)來增強(qiáng)基因治療效果。這些病毒對(duì)下游的純化策略產(chǎn)生了顛覆性影響。 常用于基因治療的病毒載體尺寸示意圖:腺相關(guān)病毒AAV、慢病毒LVV、單純皰疹病毒HSV和痘苗病毒VACV 對(duì)于這些尺寸較大的病毒載體,傳統(tǒng)的基于瓊脂糖的層析方法在工藝放大、產(chǎn)量提升以及雜質(zhì)(如HCP等)去除等方面存在局限性。為了解決這些瓶頸問題,Astrea Bioseparations研發(fā)推出的新一代基于納米纖維的層析介質(zhì)LentiHERO為病毒純化提供了新的思路。相比于傳統(tǒng)的瓊脂糖基質(zhì),LentiHERO不論從結(jié)合載量、雜質(zhì)去除還是工藝放大等方面都具有顯著優(yōu)勢(shì)。以下研究將從病毒的結(jié)合能力、回收率、HCP和dsDNA的去除能力、工藝放大等方面充分評(píng)估LentiHERO對(duì)不同包膜(VSV-G、4070A、GalV)的LVV假病毒和溶瘤病毒HSV的純化性能。1. LVV生產(chǎn)和純化工藝流程 LentiHERO對(duì)VSV-G LVV有更高的結(jié)合力與動(dòng)態(tài)結(jié)合載量 下圖是VSV-G LVV樣品在不同流速下通過LentiHERO(LH)與Q膜流穿液的TU和p24檢測(cè)結(jié)果,LentiHERO對(duì)LVV的結(jié)合能力顯著高于Q膜。由此表明,LeniHERO在LVV流穿之前能夠處理更大體積的料液。 LentiHERO有更高的動(dòng)態(tài)結(jié)合載量 提升LVV回收率與純度的優(yōu)化方案 如下圖所示,條件優(yōu)化后LVV回收率提升至82%,收獲的病毒滴度>2E+9 TU/mL,且HCD/HCP去除率>90%。 LentiHERO®可大幅減少純化的緩沖液體積生產(chǎn)規(guī)模所需的緩沖液體積預(yù)估 精氨酸洗脫可以省去洗脫后的稀釋步驟,簡(jiǎn)化工藝流程; 低鹽或精氨酸洗脫可顯著減少緩沖液用量并降低處理體積。 使用LentiHERO® 1純化非VSV-G包膜的LVV假病毒 重組慢病毒可以通過不同的包膜蛋白來提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和改變特異性,從而直接影響下游純化策略。 不同類型慢病毒在細(xì)胞和基因治療中的應(yīng)用 LentiHERO® 1對(duì)LVV的回收率(TU) LentiHERO®成功實(shí)現(xiàn)了非VSV-G慢病毒(4047A:100%,GalV:36%)的高效純化。 LentiHERO®具備強(qiáng)大的雜質(zhì)去除能力,在不影響載體功能的情況下可去除>98%的HCP及>87%的dsDNA殘留 2. HSV-1溶瘤病毒生產(chǎn)和純化工藝流程 LentiHERO®純化野生型HSV-1(KOS)的結(jié)果 篩選裝置上樣量15ml,測(cè)得填料載量為1.5E+10 IU/ml。 感染性HSV回收率為56%,LentiHERO®載量可達(dá)9.2E+9 IU/ml,大部分感染性HSV在0.6M NaCl條件下被洗脫。 LentiHERO®純化pBACYAC-HSV-1(KOS)的結(jié)果 篩選裝置上樣量20ml,測(cè)得填料載量為3E+8 IU/ml。 用0.8M精氨酸洗脫,HSV回收率可達(dá)到69%,LentiHERO®載量可達(dá)1.4E+8 IU/ml,同時(shí)實(shí)現(xiàn)高效的雜質(zhì)去除。 結(jié)論 ? LentiHERO®弱陰離子納米纖維層析技術(shù)可廣泛應(yīng)用于多種病毒載體的純化,包括不同包膜的慢病毒(4070A,VSV-G,GalV),溶瘤病毒HSV-1; ? LentiHERO®純化病毒具有高回收率:4070A: 100%,VSV-G: 82%,GalV: 36%,HSV-1: 69% ? LentiHERO®具有高效的宿主蛋白去除效率:HCP去除率>97% ? LentiHERO®可放大形成平臺(tái)工藝,適用于工業(yè)化生產(chǎn) ? LentiHERO®具備拓展應(yīng)用于其他病毒載體的潛力,如腺病毒,痘苗病毒及病毒樣顆粒(VLPs)等 ? LentiHERO®支持基因治療及溶瘤病毒生產(chǎn)工藝的優(yōu)化 產(chǎn)品信息 貨號(hào) 品名 規(guī)格 NL100100 Nereus LentiHERO 2 unit pack(離心管形式) LH0001001A LentiHERO® 1 1 mL(層析柱形式) LH0010001B LentiHERO® 10 10 mL(層析柱形式) LH0010001C LentiHERO® 100 100 mL(層析柱形式) 如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎點(diǎn)擊這里填寫信息,Astrea Bioseparations技術(shù)專家將為您提供個(gè)性化優(yōu)化方案,切實(shí)幫您解決純化工藝中的疑難問題。 Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué),擁有超過30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),是世界級(jí)層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過21個(gè)生產(chǎn)工藝通過了FDA和EMA的批準(zhǔn)。Astrea Bioseparations在全球擁有3個(gè)研發(fā)和生產(chǎn)基地,專注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù),解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時(shí)問題,實(shí)現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過程,完全符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。 西美杰是Astrea Bioseparations中國(guó)區(qū)代理,為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎隨時(shí)撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www_xmjsci_com.banxiacc.com了解更多信息。 更多>

新品上市!Cygnus 重組胰蛋白酶殘留檢測(cè)試劑盒

胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶,能特異性識(shí)別并切割細(xì)胞表面粘附蛋白中的精氨酸-賴氨酸(Arg-Lys)肽鍵。在細(xì)胞疫苗生產(chǎn)和基因治療細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,被廣泛應(yīng)用于解離HEK293、Vero等貼壁細(xì)胞,使其從培養(yǎng)容器表面高效分離。然而,成品中殘留的重組胰蛋白酶不僅可能影響工藝效率和產(chǎn)品完整性,更潛藏著安全風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)此,中國(guó)藥典(2025)制定了明確的監(jiān)管要求:在生物制品通則<生物制品生產(chǎn)用原材料及輔料質(zhì)量控制>中將非動(dòng)物來源蛋白水解酶列為中等風(fēng)險(xiǎn)原料;同時(shí),<人用基因治療制品總論>中規(guī)定應(yīng)對(duì)潛在的工藝相關(guān)雜質(zhì)進(jìn)行鑒定、評(píng)估,并進(jìn)行定性和(或)定量分析。為精準(zhǔn)監(jiān)測(cè)并控制這一關(guān)鍵殘留雜質(zhì),Cygnus Technologies推出全新rTrypsin ELISA檢測(cè)試劑盒。該試劑盒基于雙抗夾心法原理,操作簡(jiǎn)便。在試劑盒開發(fā)時(shí)使用重組豬胰蛋白酶制備抗體,并經(jīng)過嚴(yán)格的抗原親和純化,從而確保了抗體對(duì)目標(biāo)分子的高度特異性。因此,本試劑盒成為理想的工藝開發(fā)工具,可用于優(yōu)化重組胰蛋白酶的去除效率,并用于常規(guī)質(zhì)量控制和產(chǎn)品放行檢測(cè),助力產(chǎn)品滿足法規(guī)要求。。rTrypsin ELISA Kit 貨號(hào)F1080產(chǎn)品性能:超高靈敏度:檢測(cè)下限~0.05 ng/mL 定量下限~0.31 ng/mL優(yōu)異精密度:批內(nèi)與批間CV均 <10% Cygnus Technologies, LLC.為生物技術(shù)和生物制藥行業(yè)提供產(chǎn)品和分析方法,旨在加速研發(fā)階段和提高產(chǎn)品質(zhì)量。Cygnus開發(fā)和生產(chǎn)的生物工藝殘留試劑盒,用于檢測(cè)超過50種不同表達(dá)系統(tǒng)的特異性雜質(zhì)。Cygnus作為專注于生物技術(shù)應(yīng)用免疫檢測(cè)的高靈敏度分析技術(shù)的專家,Cygnus的產(chǎn)品和服務(wù)已經(jīng)被幾乎所有主要的生物制藥公司使用超過25年。 北京西美杰科技有限公司作為Cygnus在中國(guó)總代理,與國(guó)內(nèi)眾多知名藥企,CRO/CMO企業(yè)建立了長(zhǎng)久穩(wěn)定的合作關(guān)系。多年來西美杰的產(chǎn)品及服務(wù)幫助許多企業(yè)加速R&D階段,提高藥物質(zhì)量、純度和安全,加速優(yōu)化研發(fā)工藝,減少產(chǎn)品上市時(shí)間,降低QC成本。如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電西美杰客服熱線400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www_xmjsci_com.banxiacc.com了解更多信息。 更多>

Pfanstiehl 喜獲第18個(gè)CDE登記號(hào)-甘氨酸Glycine G-140

“熱烈祝賀Pfanstiehl的注射級(jí)甘氨酸Glycine(G-140)喜獲CDE登記號(hào)F20250000403, 這是Pfanstiehl產(chǎn)品獲得的第18個(gè)CDE登記號(hào)!”甘氨酸在醫(yī)藥輔料制劑中應(yīng)用廣泛,, 可作為緩沖劑,增溶劑,穩(wěn)定劑等,具有諸多優(yōu)勢(shì)。Pfanstiehl秉承一貫高品質(zhì)理念,為滿足全球生物制藥行業(yè)對(duì)于高品質(zhì)甘氨酸的需求,隆重推出的注射級(jí)甘氨酸Glycine (G-140), 具有超高純度,超低內(nèi)毒素,超低金屬殘留的特點(diǎn),單獨(dú)檢測(cè)29種金屬離子,并且新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶和脂肪酶,亞硝酸鹽等多項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)的檢測(cè),符合多國(guó)藥典規(guī)定(USP, EP, BP, JPE, ChP),可用于生物治療性藥物和疫苗的生產(chǎn)。產(chǎn)品信息:· 產(chǎn)品名稱:Glycine, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals, USP, EP, BP, JPE, ChP (G-140)· 中文名稱:甘氨酸· 分子式:C2H5NO2· 分子量:75.07 g / mol· CAS號(hào):56-40-6· 產(chǎn)品貨號(hào):G-140產(chǎn)品特點(diǎn): · 超高純度,超低內(nèi)毒素,超低微生物含量,超低金屬雜質(zhì)殘留· 質(zhì)量指標(biāo)新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶,脂肪酶和亞硝酸鹽檢測(cè)· 符合多國(guó)藥典:USP, EP, BP, JPE, ChP· 符合ICH Q3D標(biāo)準(zhǔn)· 符合GMP標(biāo)準(zhǔn)· 已獲DMF和CDE登記號(hào) 產(chǎn)品應(yīng)用:· 緩沖劑· 穩(wěn)定劑· 增溶劑如果您對(duì)Pfanstiehl注射級(jí)別Glycine G-140感興趣,歡迎聯(lián)系Pfanstiehl 中國(guó)區(qū)代理商北京西美杰科技有限公司獲得如下詳細(xì)的產(chǎn)品概況說明文件和測(cè)試樣品。Pfanstiehl Inc.最新產(chǎn)品系列如下,歡迎聯(lián)系北京西美杰科技有限公司獲取100g裝免費(fèi)樣品。北京西美杰科技有限公司為Pfanstiehl中國(guó)代理,為客戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www_xmjsci_com.banxiacc.com了解更多信息。 更多>

SeraCare?KPL高性價(jià)比ELISA底物

西美杰代理的LGC·SeraCare·KPL(以下簡(jiǎn)稱KPL)是全球知名親和純化商業(yè)二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,擁有40余年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn),獲得ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證,產(chǎn)品批間穩(wěn)定,品質(zhì)可靠,深受廣大診斷企業(yè)喜愛和好評(píng)。KPL旗下產(chǎn)品線包含高性價(jià)比二抗、底物顯色試劑及免疫輔助試劑等,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)研究、診斷試劑開發(fā)及臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。 KPL高性價(jià)比底物及通用試劑廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、免疫印跡(WB)、免疫組化(IHC)和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(ELISpot)等實(shí)驗(yàn)。本文將重點(diǎn)介紹KPL高性價(jià)比ELISA底物系列產(chǎn)品。 在ELISA檢測(cè)中,3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)憑借其高靈敏度、強(qiáng)吸光性、操作簡(jiǎn)便性、安全性以及廣泛的兼容性,成為辣根過氧化物酶(HRP)顯色檢測(cè)的首選底物。KPL公司開發(fā)的SureBlue?TMB是普通TMB底物的優(yōu)化版本,擁有超過30年的應(yīng)用歷史,具備更高的靈敏度、穩(wěn)定的質(zhì)量、低批間差異以及無致癌性等特性。SureBlue Reserve?TMB是SureBlue?TMB的進(jìn)一步優(yōu)化版本,其檢測(cè)靈敏度較SureBlue?TMB提高了50%,且為水基底物,不含DMF或DMSO,采用即用型單組分配方,操作便捷,有效期長(zhǎng)達(dá)24個(gè)月。 產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 靈敏度 SureBlue Reserve? TMB 1-Component Microwell Peroxidase Substrate 5120-00815120-00825120-0083 100 mL 400 mL 1000 mL HRP 5*10-16 SureBlue? TMB 1-Component Microwell Peroxidase Substrate 5120-0075 5120-00765120-00775120-0078 100 mL 100 mL 1000 mL 5000 mL HRP 10-15 TMB 2-ComponentMicrowell Peroxidase Substrate Kit 5120-00535120-00475120-0050 200 mL 600 mL 2700 mL HRP 5*10-15 ABTS&reg;是一種通用型底物,含有2,2'-聯(lián)氮基-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)。它提供較寬的工作范圍,適合在需要低背景和中等靈敏度的場(chǎng)景中使用。在辣根過氧化物酶標(biāo)記的偶聯(lián)物存在下,ABTS在405至410 nm顯藍(lán)綠色,且反應(yīng)停止后顏色保持不變。它推薦用于ELISA應(yīng)用,有單組分和雙組分兩種形式可供選擇。 產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 靈敏度 ABTS&reg; 1-Component Microwell Peroxidase Substrate Kit 5120-00465120-00415120-0043 100 mL 6x100 mL 1000 mL HRP 10-13 ABTS&reg; 2-Component Microwell Peroxidase Substrate Kit 5120-00325120-0033 6x10 mL 6x450 mL HRP 10-13 BluePhos&reg;是一種專為堿性磷酸酶標(biāo)記偶聯(lián)物設(shè)計(jì)的底物,是 4-硝基苯磷酸二鈉(pNPP) 的高效替代品,作為可溶性的專利 BCIP 形式,它提供更高的靈敏度、更寬的工作范圍、更低的背景信號(hào)和更高的使用便利性。該底物采用雙組分形式,混合后即可使用,在微孔板或試管中反應(yīng)時(shí)可產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,適用于定性和定量免疫分析,與橙色或黃色底物相比,它能提供更清晰的視覺區(qū)分。產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 靈敏度 BluePhos&reg; Microwell Substrate(2-C) 5120-0061 5120-0059 5120-0060 50 mL 600 mL 2700 mL AP 10-13 LumiGLO&reg;和LumiGLO Reserve?化學(xué)發(fā)光底物是一種基于魯米諾的化學(xué)發(fā)光底物,專為與辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的報(bào)告分子配合使用而設(shè)計(jì),LumiGLO Reserve?在信號(hào)強(qiáng)度方面進(jìn)行了改進(jìn),比 KPL LumiGLO&reg;和其他競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品靈敏度高出20倍以上,LumiGLO&reg;和LumiGLO Reserve? 化學(xué)發(fā)光底物專門用于檢測(cè)低豐度的蛋白質(zhì)或來自珍貴樣本的蛋白質(zhì)。 產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 靈敏度 LumiGLO Reserve? Chemiluminescent Substrate(3-C) 5430-00505430-00515430-0049 600 cm2 1000 cm2 2400 cm2 HRP 10-15-10-12 LumiGLO&reg; Chemiluminescent Substrate(2-C) 5430-00425430-00405430-0041 60 mL 240 mL 720 mL HRP 10-12 PhosphaGLO? AP和PhosphaGLO Reserve? AP底物均基于二氧雜環(huán)丁烷的化學(xué)發(fā)光原理設(shè)計(jì),專用于與磷酸酶(AP)標(biāo)記的報(bào)告分子配合使用。其中,PhosphaGLO Reserve? AP底物在信號(hào)強(qiáng)度上實(shí)現(xiàn)了顯著提升,特別適用于檢測(cè)低豐度蛋白質(zhì)以及珍貴樣本中的目標(biāo)蛋白質(zhì)。PhosphaGLO?和PhosphaGLO Reserve? AP系列底物均以穩(wěn)定的單組分溶液形式提供,便于實(shí)驗(yàn)操作,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可通過X光膠片或化學(xué)發(fā)光成像儀進(jìn)行記錄,以獲得永久性記錄。在ELISA實(shí)驗(yàn)中,建議使用化學(xué)發(fā)光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè),以實(shí)現(xiàn)更高的檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性。 產(chǎn)品名稱 貨號(hào) 規(guī)格 反應(yīng)酶 靈敏度 PhosphaGLO Reserve? AP Substrate(1-C) 5430-00525430-0053 30 mL 100 mL AP 10-15 PhosphaGLO? AP Substrate(1-C) 5430-00545430-0055 30 mL 100 mL AP 10-12 KPL的底物系列產(chǎn)品以其卓越的性能深受科研工作者和診斷試劑生產(chǎn)商的青睞。這些底物具有高靈敏度、批間穩(wěn)定、長(zhǎng)有效期、單組分或多組分可選、使用方便、安全環(huán)保且無致癌性等特點(diǎn),并提供多種規(guī)格以滿足不同需求。KPL還為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、免疫印跡(WB)、免疫組化(IHC)和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(ELISpot)實(shí)驗(yàn)提供各種輔助試劑,如包被液、封閉液、洗滌液和終止液等。歡迎撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www_xmjsci_com.banxiacc.com了解更多信息。KPL的底物系列產(chǎn)品憑借其多樣化的選擇和卓越的性能,已成為免疫學(xué)研究和診斷試劑開發(fā)領(lǐng)域的首選品牌。 關(guān)于LGC·Seracare·KPL品牌 KPL(Kinetic Plasmonics Laboratories)是一家在生物科學(xué)領(lǐng)域具有深厚歷史和卓越聲譽(yù)的公司。作為世界上較早實(shí)現(xiàn)親和純化二抗商業(yè)化的生物公司之一,KPL憑借其在該領(lǐng)域的先驅(qū)地位奠定了堅(jiān)實(shí)的發(fā)展基礎(chǔ)。此外,KPL也是世界上較大的二抗和底物顯色系統(tǒng)生產(chǎn)商,擁有近40年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn),積累了豐富的專業(yè)知識(shí)和技術(shù)實(shí)力。公司通過ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證,確保所有產(chǎn)品的批間差小,品質(zhì)可靠。KPL的產(chǎn)品以高純度、高靈敏度和高信噪比(信號(hào)強(qiáng)、背景低)為特點(diǎn),深受科研人員和診斷企業(yè)的信賴。2013年,KPL被體外診斷試劑供應(yīng)商SeraCare收購(gòu),進(jìn)一步鞏固了其在行業(yè)內(nèi)的領(lǐng)先地位。SeraCare成立于1984年,是全球體外診斷制造商和臨床實(shí)驗(yàn)室的主要合作伙伴,2018年成為L(zhǎng)GC集團(tuán)的一部分。北京西美杰作為L(zhǎng)GC·Seracare·KPL品牌的中國(guó)區(qū)總代理,致力于KPL優(yōu)秀產(chǎn)品的中國(guó)推廣,為國(guó)內(nèi)的廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù)。 更多>

新品上市 | Alzet給藥泵100ul緩釋6周(Model 1006)

ALZET新推出了Model 1006給藥泵,作為滲透壓給藥泵系列產(chǎn)品線的最新成員,該新型號(hào)可實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)達(dá)6周的持續(xù)給藥,是目前在100μl規(guī)格Alzet泵中緩釋時(shí)間最長(zhǎng)的泵。Model 1006 在小劑量、長(zhǎng)周期的動(dòng)物給藥應(yīng)用中樹立了新的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。該產(chǎn)品專為臨床前研究設(shè)計(jì),能夠精確且穩(wěn)定地輸注包括藥物、激素及其他化合物在內(nèi)的多種制劑,是適用于需長(zhǎng)期維持恒定輸注速率的慢性研究項(xiàng)目的理想解決方案。 1006 Alzet泵優(yōu)勢(shì)特點(diǎn): 6周緩釋給藥——是目前100μl規(guī)格中緩釋時(shí)間最長(zhǎng)的泵尺寸精巧——適用于小鼠和其他小型動(dòng)物精確輸注——確保可靠且穩(wěn)定的緩釋速率Alzet 1006泵參數(shù): 給藥體積:100μl 緩釋速率:0.08μl/h 持續(xù)給藥時(shí)間:6周 預(yù)啟動(dòng)時(shí)間:72h 點(diǎn)擊這里獲取1006 Alzet泵詳細(xì)使用指南。 Alzet滲透壓給藥泵產(chǎn)品列表 型號(hào) 品名 規(guī)格 1003D 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋3天 10個(gè)/盒 1007D 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋7天 10個(gè)/盒 1002 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋2周 10個(gè)/盒 1004 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋4周 10個(gè)/盒 1006 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋6周  NEW 10個(gè)/盒 2001D 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋1天 10個(gè)/盒 2001 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋1周 10個(gè)/盒 2002 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋2周 10個(gè)/盒 2004 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋4周 10個(gè)/盒 2006 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋6周 10個(gè)/盒 2ML1 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋1周 10個(gè)/盒 2ML2 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋2周 10個(gè)/盒 2ML4 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋4周 10個(gè)/盒 北京西美杰科技有限公司是Alzet中國(guó)一級(jí)代理,可為您提供全方位的售前售后技術(shù)支持,如果您需要更多Alzet緩釋給藥泵資料,歡迎撥打西美杰全國(guó)客服熱線400-050-4006或登錄西美杰官方網(wǎng)站www_xmjsci_com.banxiacc.com查詢訂購(gòu)。 更多>

HCP ELISA實(shí)驗(yàn)布板優(yōu)化指南:提升數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的關(guān)鍵

截至目前,ELISA方法仍是工藝監(jiān)測(cè)和產(chǎn)品批次放行中檢測(cè)并定量HCP的金標(biāo)準(zhǔn)。Cygnus提供HCP 檢測(cè)試劑盒已經(jīng)超過25年,開發(fā)了許多專利方法生產(chǎn)對(duì)HCP具有廣泛反應(yīng)性的抗體,目前提供超過32種不同的表達(dá)平臺(tái)的HCP ELISA檢測(cè)試劑盒。 Cygnus的ELISA試劑盒使用預(yù)包被板,檢測(cè)同時(shí)加入抗原與檢測(cè)抗體進(jìn)行孵育。HCP檢測(cè)實(shí)際上相當(dāng)復(fù)雜,主要依賴于能夠?qū)?shù)千種HCP產(chǎn)生反應(yīng)的HCP抗體,要使 ELISA檢測(cè)的結(jié)果準(zhǔn)確,針對(duì)抗原的捕獲和檢測(cè)抗體必須都要過量。只有在抗體過量的條件下,才能得到正斜率的劑量曲線,從而實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的定量。因此,合理的孔板布局設(shè)置是一個(gè)很好的開始。Cygnus HCP ELISA檢測(cè)基本流程 一、HCP ELISA布板規(guī)范 1. 復(fù)孔要求 推薦采用三復(fù)孔設(shè)計(jì),三個(gè)復(fù)孔是最有效的做法,可以發(fā)現(xiàn)并去除可能出現(xiàn)的異常值,在完成實(shí)驗(yàn)后做問題排查時(shí)能提供更多信息。需要注意的是,如果檢測(cè)樣品數(shù)量不支持設(shè)置三復(fù)孔,那么最少要設(shè)置雙復(fù)孔,沒有復(fù)孔的檢測(cè)是無效的。如果可以的話,最好對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品設(shè)置三復(fù)孔。 2. 空白對(duì)照 不建議設(shè)置額外的空白對(duì)照,扣除空白對(duì)照不會(huì)改善實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至還會(huì)導(dǎo)致CV值升高。詳情請(qǐng)參考《使用Cygnus ELISA試劑盒該如何設(shè)置空白對(duì)照?》。 3. 設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照。 使用處于標(biāo)準(zhǔn)曲線中間濃度范圍的標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照(低濃度標(biāo)準(zhǔn)品受靈敏度影響較大)。當(dāng)使用來自HCP標(biāo)準(zhǔn)品的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),曲線中間的濃度點(diǎn)通常會(huì)提供最多的信息。 4. 設(shè)置陰性對(duì)照 使用樣品稀釋液作為空白對(duì)照,從而評(píng)估0濃度標(biāo)準(zhǔn)品與所使用的稀釋液之間是否存在顯著偏差。 5. 設(shè)置1-2個(gè)額外的HCP對(duì)照 可以使用工藝流程中的一個(gè)已經(jīng)過充分表征的在制品樣品作為額外的HCP對(duì)照。有富余孔的條件下,設(shè)置兩個(gè)稀釋度會(huì)比只有一個(gè)稀釋度效果更好。 6. 使用低結(jié)合板優(yōu)化加樣步驟 在向孔板加樣時(shí),最重要的是要思考完成每一步驟需要多長(zhǎng)時(shí)間,每一步驟的移動(dòng)方向是什么。對(duì)于這種情況,預(yù)先將待檢樣品和酶標(biāo)二抗加入低結(jié)合板內(nèi),然后再整個(gè)轉(zhuǎn)移到檢測(cè)孔板中,這樣能夠大幅減少將樣品添加到檢測(cè)板時(shí)造成的加樣誤差。 二、ELISA布板示例 樣品布板的最佳方式是將標(biāo)準(zhǔn)品置于板的左側(cè),將對(duì)照品(陰性或陽(yáng)性對(duì)照)置于板的右側(cè),同時(shí)還要考慮需要設(shè)置的復(fù)孔數(shù)量,樣品稀釋梯度,以及在加樣和洗板時(shí)的移動(dòng)方向。將標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品分別置于板的兩側(cè),確保可以從孔板的任意一側(cè)都能獲取相同的信息。這樣能夠清晰地反映出在加樣時(shí)或洗板過程中可能出現(xiàn)的任何操作失誤,而且通過改變這些孔在板內(nèi)的位置能夠更好地進(jìn)行問題排查。 三復(fù)孔布板推薦示意圖 5個(gè)樣品4個(gè)稀釋梯度,所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣品及對(duì)照品都設(shè)置三個(gè)復(fù)孔 雙復(fù)孔布板推薦示意圖 4個(gè)樣品和加標(biāo)控制品都設(shè)置4稀釋梯度,所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣品及對(duì)照品都設(shè)置雙復(fù)孔 未知濃度HCP樣品布板推薦示意圖 4個(gè)樣品8個(gè)稀釋梯度,以便收集未知HCP水平樣品的大部分信息。 更多布板示例文末獲取。 三、HCP ELISA布板常見問題排查及解決辦法 1. 加樣問題 在HCP ELISA檢測(cè)過程中,每2分鐘的靜態(tài)孵育相當(dāng)于1分鐘的震蕩孵育。也就是說,如果加樣耗費(fèi)了20分鐘,就相當(dāng)于最先加入的樣品比最后加入的樣品多孵育了10分鐘。假如震蕩孵育的時(shí)間為1個(gè)小時(shí),而加樣就花費(fèi)了20分鐘,那么勢(shì)必會(huì)導(dǎo)致前后加入的樣品結(jié)合效率有差異,結(jié)果表現(xiàn)為最先加入的樣品會(huì)得到偏高的OD值。因此,加樣的原則是要確保板內(nèi)所有孔的孵育時(shí)間盡可能一致。如果一次需要檢測(cè)的樣品數(shù)量較多,為了避免在加樣過程耗費(fèi)太多時(shí)間,我們建議先將樣品和酶標(biāo)抗體加入低結(jié)合板中,然后再用排槍快速轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板內(nèi)。實(shí)踐證明,這種操作方法可以有效改善因加樣時(shí)間差而導(dǎo)致的結(jié)果異常問題。 2. 洗板問題 不合理的洗板操作也會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的異常,與加樣操作類似,HCP ELISA洗板需要遵循的核心原則就是交替方向洗板,也就是盡可能確保所有孔的總清洗時(shí)間一致。關(guān)于洗板操作的注意事項(xiàng)請(qǐng)參考《如何用正確的洗板方法解決ELISA檢測(cè)結(jié)果漂移的問題?》 四 常見錯(cuò)誤案例與改進(jìn)辦法 案例一 加樣緩慢造成的誤差 如果同一個(gè)樣品依次從A到H行,按照1到12列方向逐孔緩慢加樣,即使采用了正確的洗板方式,這種加樣方式也會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。以下熱圖示例展示了如果將相同的樣品以緩慢的速度加入孔板會(huì)發(fā)生的情況。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 1.000 0.976 0.952 0.928 0.904 0.880 0.856 0.832 0.808 0.784 0.760 0.736 B 0.997 0.973 0.949 0.925 0.901 0.877 0.853 0.829 0.805 0.781 0.757 0.733 C 0.994 0.970 0.946 0.922 0.898 0.874 0.850 0.826 0.802 0.778 0.754 0.730 D 0.991 0.967 0.943 0.919 0.895 0.871 0.847 0.823 0.799 0.775 0.751 0.727 E 0.988 0.964 0.940 0.916 0.892 0.868 0.844 0.820 0.796 0.772 0.748 0.724 F 0.985 0.961 0.937 0.913 0.889 0.865 0.841 0.817 0.793 0.769 0.745 0.721 G 0.982 0.958 0.934 0.910 0.886 0.862 0.838 0.814 0.790 0.766 0.742 0.718 H 0.979 0.955 0.931 0.907 0.883 0.859 0.835 0.811 0.787 0.763 0.739 0.715 改進(jìn)辦法:預(yù)先在低結(jié)合板中加入酶標(biāo)抗體和樣品,之后再用排槍將所有樣品快速轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板中進(jìn)行孵育。這樣可以有效減少不同孔加樣的時(shí)間差,確保所有孔的孵育時(shí)間盡可能一致,進(jìn)而降低異常值出現(xiàn)的概率。 案例二 同一個(gè)方向洗板造成的誤差 如果4次洗板都是同一個(gè)方向加入洗液的話,也會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響。以下熱圖示例展示了4次洗板都是用排槍按照1到12列加入洗液可能發(fā)生的情況。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 B 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 C 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 D 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 E 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 F 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 G 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 H 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 改進(jìn)辦法:建議采用交替方向的方式洗板,也就是第1和3次洗板與第2和4次洗板要從相反的方向加入洗液。 五 HCP ELISA結(jié)果異常案例與問題排查 如下圖所示,該檢測(cè)結(jié)果樣品復(fù)孔之間出現(xiàn)自左向右的降低的趨勢(shì),且孔板右側(cè)的陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照的OD值都比左側(cè)低。通過兩側(cè)陽(yáng)性對(duì)照結(jié)果不一致可以判定此次實(shí)驗(yàn)是失敗的。此外,左側(cè)陰性對(duì)照復(fù)孔之間OD值的平均差異為0.01,而右側(cè)陰性對(duì)照的OD值則接近背景水平,因此還需更多信息來進(jìn)一步判斷問題來自加樣還是洗板。 綜上所述,本次實(shí)驗(yàn)失敗的原因可能為:1、加樣太慢;2、洗板沒有交替方向的操作。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A STD 1 Sample 1 Dilution 1 Sample 3 Dilution 1 Sample 5 Dilution 1 B STD 2 Sample 1 Dilution 2 Sample 3 Dilution 2 Sample 5 Dilution 2 C STD 3 Sample 1 Dilution 3 Sample 3 Dilution 3 Sample 5 Dilution 3 D STD 4 Sample 1 Dilution 4 Sample 3 Dilution 4 Sample 5 Dilution 4 E STD 5 Sample 2 Dilution 1 Sample 4 Dilution 1 Negative Control (Diluent) F STD 6 Sample 2 Dilution 2 Sample 4 Dilution 2 Control Dilution 1(External HCP) G STD 7 Sample 2 Dilution 3 Sample 4 Dilution 3 Control Dilution 2 (External HCP) H STD 8 Sample 2 Dilution 4 Sample 4 Dilution 4 Postive Control (STD 5 repeat) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 2.500 2.450 2.400 1.200 1.150 1.100 2.000 1.950 1.900 1.700 1.650 1.600 B 1.200 1.150 1.100 0.600 0.550 0.500 1.000 0.950 0.900 0.850 0.800 0.750 C 0.600 0.550 0.500 0.300 0.280 0.260 0.500 0.480 0.460 0.425 0.405 0.385 D 0.300 0.250 0.200 0.150 0.140 0.130 0.250 0.240 0.230 0.212 0.202 0.192 E 0.150 0.130 0.110 1.400 1.350 1.300 0.125 0.115 0.105 0.005 0.005 0.005 F 0.075 0.065 0.055 0.700 0.650 0.600 0.550 0.500 0.450 0.230 0.225 0.220 G 0.038 0.033 0.028 0.350 0.330 0.310 0.290 0.270 0.250 0.115 0.095 0.075 H 0.015 0.010 0.005 0.175 0.165 0.155 0.145 0.135 0.125 0.090 0.080 0.070 總結(jié) ? 在ELISA實(shí)驗(yàn)之前應(yīng)該合理規(guī)劃孔板布局:優(yōu)化的孔板布局能夠監(jiān)測(cè)關(guān)鍵性能指標(biāo),并在出現(xiàn)問題時(shí)更快地進(jìn)行問題排查。更多布板示例請(qǐng)點(diǎn)擊這里獲取。 ? HCP ELISA的關(guān)鍵考慮因素包括:復(fù)孔設(shè)置、樣品稀釋梯度、加樣和洗板的操作、對(duì)照的設(shè)置。 ? 用低結(jié)合板來優(yōu)化加樣操作,可以最大程度減少OD值的偏差。 ? 切勿使用空白對(duì)照,這樣做會(huì)提高檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)。 相關(guān)產(chǎn)品推薦: 品名:Sample Treatment Plate (樣品處理板) 貨號(hào):F402 規(guī)格:1 plate Cygnus Technologies, LLC.為生物技術(shù)和生物制藥行業(yè)提供產(chǎn)品和分析方法,旨在加速研發(fā)階段和提高產(chǎn)品質(zhì)量。Cygnus開發(fā)和生產(chǎn)的生物工藝殘留試劑盒,用于檢測(cè)超過50種不同表達(dá)系統(tǒng)的特異性雜質(zhì)。Cygnus作為專注于生物技術(shù)應(yīng)用免疫檢測(cè)的高靈敏度分析技術(shù)的專家,Cygnus的產(chǎn)品和服務(wù)已經(jīng)被幾乎所有主要的生物制藥公司使用超過25年。 北京西美杰科技有限公司作為Cygnus在中國(guó)總代理,與國(guó)內(nèi)眾多知名藥企,CRO/CMO企業(yè)建立了長(zhǎng)久穩(wěn)定的合作關(guān)系。多年來西美杰的產(chǎn)品及服務(wù)幫助許多企業(yè)加速R&D階段,提高藥物質(zhì)量、純度和安全,加速優(yōu)化研發(fā)工藝,減少產(chǎn)品上市時(shí)間,降低QC成本。如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電西美杰客服熱線400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www_xmjsci_com.banxiacc.com了解更多信息。 更多>

AppliChem低內(nèi)毒素原料:為降低生物工藝風(fēng)險(xiǎn)保駕護(hù)航

西美杰代理PanReac AppliChem 作為擁有百年歷史的歐洲生物化學(xué)試劑與制藥原料生產(chǎn)商,專注提供低內(nèi)毒素原料,可有效降低生物工藝風(fēng)險(xiǎn)。其產(chǎn)品符合 USP、EP、JP、ChP 等多國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn),具備超低內(nèi)毒素水平、嚴(yán)格質(zhì)量控制及批次一致性,為科研人員、制藥企業(yè)及培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)提供可靠支持,助力保障藥品安全性與工藝穩(wěn)定性。 更多>

新品推薦 | 肌肉生長(zhǎng)抑制素檢測(cè)試劑盒

Immundiagnostik(IDK)德國(guó)進(jìn)口肌肉生長(zhǎng)抑制素檢測(cè)試劑盒(貨號(hào) KR1012),采用酶聯(lián)免疫法,可定量測(cè)定人血清、EDTA 血漿中肌肉生長(zhǎng)抑制素含量,樣本量?jī)H需 20μl,標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍 0.4-32.5ng/ml,96T 規(guī)格滿足實(shí)驗(yàn)需求。該試劑盒適用于骨骼肌生長(zhǎng)調(diào)控、肌肉減少癥等相關(guān)研究,屬科研專用(RUO)。作為 IDK 中國(guó)代理,北京西美杰科技提供完善技術(shù)支持與售后服務(wù),助力科研人員高效開展實(shí)驗(yàn)。 更多>

about us關(guān)于我們

西美杰介紹

北京西美杰科技有限公司(Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd,以下簡(jiǎn)稱西美杰)于2006年成立,由留美歸國(guó)生物領(lǐng)域?qū)I(yè)人士創(chuàng)辦。西美杰堅(jiān)持自己的經(jīng)營(yíng)理念,勤奮踏實(shí)地整合全球產(chǎn)品資源與技術(shù)資源,為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產(chǎn)企業(yè)提供一站式產(chǎn)品服務(wù)方案,幫助科研及企業(yè)單位縮短科研時(shí)間... 更多>

brand代理品牌

在線客服

我們的營(yíng)業(yè)時(shí)間: 8:30-17:30

  •   北京客服1
  •   北京客服2
  •   上海客服
  •   成都客服
  •   廣州客服
日韩三级黄色免费网站,xxx天天操夜夜操,成人美女黄网站色大全,日韩大尺度视频网站,国产美女高潮抽搐流水在线看,久久久久黄色片免费,国产精品国产三级在线专区借种,十八禁动漫视频在线观看,欧美成人 一区二区 哪里可以看欧美黄片,亚洲精品sm一区二区男男h,哦啊!揉啊舔啊好舒服啊视频,久久99er热这里只有精品,吞精人妻深喉国产精品,成人午夜免费无码视频播放器,蜜桃网站视频在线播放,欧美大尺度伦理片免费在线播放,东北女人露脸自拍视频在线观看 免费观看高清黄色往站,色偷偷超碰av人人做人人爽,男人天堂 亚洲av,蜜桃视频在线观看99,欧美在线不卡免费观看,黄色污污的视频软件,欧美资源在线视频网,激情片视频在线观看,亚洲不卡av一区二区 日本japanese丰满多毛,99精品高清一区二区,轻轻的第一次在线观看,亚洲精品尤物av在线观看任我爽,男生把鸡鸡桶进女生的屁股里,中文字幕有码第1页,欧美电影美丽小蜜桃,在线观看国产探花视频,欧美成年人一级电影 小蜜桃在线高清观看,大香蕉精品久久精品,美女张开双腿让男人往里面捅,五月天丁香婷婷av,91精品推荐在线成人播放激情,亚洲中文字幕人妻有码,亚洲欧美一区二区三区国产精品,波多野中文字幕v在线2019,日本视频久久久精品 丁香六月欧美成人黑,美女张开大腿让男人操,18岁以下禁看网站,91福利社在线播放,亚洲白拍 色综合图区,婷婷丁香四月色综合,日韩成人免费啪啪视频,亚洲精品国产精品乱码,男女性激情免费视频
亚洲精品亚洲成人网 丝袜美腿在线观看四区 开心快乐激情五月天 日韩欧美一区二区不卡 国产无套内射小骚货 欧美在线天堂一区二区
免费观看高清黄色往站 午夜日韩在线免费视频 十八禁视频在线播放亚洲 一二三四视频免费在线 又大又色又爽的视频 日韩熟女人妻一区二区
麻豆精品一区二区综合 日韩av中文字幕在线播放网 色男人亚洲天堂社区 中文字幕 亚洲色图 日本邻居少妇人妻p 在线看中文字幕av
在线免费国产亚洲视频 久久精品久久久大学生 国产又粗又长又爽在线观看 国产精品亚洲日本在线观看 亚洲欧美日韩欧美一区二区三区 久久天天躁日日躁狠狠躁黑人 国产成人综合亚洲精品国产 看黄色一区二区片看亚色片 大香蕉在线视频青青草 欧美一区二区不卡中文字幕 色婷婷在线视频免费观看 欧美日本一区二区三区免费 不卡的av中文字幕在线播放 久青青草视频手机在线免费观看 91学生精品一区二区三区高清 97超级碰碰碰最新更新内容 中文无线乱码乱码无限 天天操夜夜操狠狠狠操 91九色精品日韩内射 欧美一区二区三区久久精品视 日韩一级毛一片欧美一级 后入白嫩少妇视频在线观看 亚洲中文字幕一区高清在线 日本办公室三级在线观看 懂色av区二区三区av 日韩精品三区在线观看 国产精品自在在线影院 韩国免费a级作爱片码 日本一区二区不卡视频播放 免费av一区二区三区 中文字幕免费不卡一区 日韩亚洲精选一区二区三区 开心五月激情五月天天五月五月天 亚洲一区二区不卡电影在线 日本 午夜 在线 视频 精品日韩一区二区电影 国产精品人妻一码二码 日本精品二区四区五区 91亚洲午夜精品久久久久久 亚洲图片日韩色图日韩色图日韩 98欧美日韩精品亚洲欧美 日韩欧美亚洲国产精品 欧美视频一区二区在线播放 三上悠亚亚洲精品一区二区 国产精品女同一区二区软件 看一下久久免费的一级黄片 国产麻豆精品免费av 国产日韩欧美床上吃兔兔 极品国产三级在线观看 午夜精品女同一区二区三区 国内精品国产三级国产99 欧美日韩区一区二在线观看免费 日本精品秘a在线观看 五月天开心激情欧美日韩 日韩欧美亚洲综合精品 欧美的美女和男人射精的网站 亚洲春色视频在线观看 亚洲最大黄色三级视频 大香蕉久久91免费视频 国产精品白浆在线观看免费 国产三级农村妇女视频 亚洲欧美中文字幕日韩一区91 国产一区二区三区免费视频网站 国产精品久久久久久人婷婷 美女少妇一区二区三区四区久久 日韩欧美亚洲国产精品 人与动物杂交1区2区在线观看 精品国产亚洲av未满十八 亚洲女同性恋在线播放 丰满的女人一区二区三区 国产 欧美 日本一区 日韩激情专区视频在线播放 韩国三级国产三级一区久久 国产精品一级二级三级久久久 免费人成在线视频播放 91精品啪在线观九色 日韩欧美一区二区不卡看片 成人黄色三级免费网站 成人免费毛片1000部 97视频在线观看精品在线 在线观看高清免费国产 欧美日韩精品亚洲综合蜜臀 麻豆精品三级国产国语 精品亚洲无人1区二区 久久国产亚洲欧美一区二区三区 精品亚洲无人1区二区 夜夜嗨一区二区三区日韩 亚洲第一区大尺度视频在线观看 亚洲中文字幕乱码精品区 一区二区三区岛国av毛片 精品盗摄一区二区三区 日本一区二区三区爱爱视频 日本一区二区高清视频在线观看 刚发育粉嫩国产精品29 国产一区二区精品草草影院 婷婷基地五月激情五月 91精品久久福利丨黑人 欧美日韩亚洲另类在线观看 国产在线精品自偷自拍 91精品国产99久久久久久红楼 亚洲欧美激情三级啊啊啊啊 在线观看免费欧美一区二区 丁香花电影高清在线小说阅读 久久精品国产av一一区 黄色三级视频一区二区三区 日韩一级精品视频免费在线看 开心五月深深爱天天天操 黄色av免费网站在线 日本一区二区精品专区 少妇夜夜春夜夜爽试看视频 日本一级a级黄免视频 黄色小说av网站在线看 久久综合之综合久久aⅴ 美女啪啪一区二区三区视频 亚洲视频在线观看青青草 国产护士小芳三级av 国产日本韩国三级视频 青草青草亚洲一区二区三区 青青草视频在线播放观看 变态另类成人av一区二区 污污污视频国产精品免费 日本一区二区三区电影免费观看 99久久精品国产熟女拳交 日韩精品免费一区二区 欧美精品日本十八小视频 中国日本韩国欧美一区二区三区 四虎国产精品久久久久久 中国少妇一区二区三区 亚洲黄色大片在线免费观看 黄色av片在线免费看 av网站一区二区在线 色妞av一区二区在线观看 一区二区三区中文字幕清晰 亚洲人成在久久综合网站 q亚洲av第二区国产精品 亚洲国产日韩精品综合 日本中文字幕熟女视频 三级久久久伦理aaa 欲色福利网免费在线播放 91麻豆精品91久久久久久清纯 日本中文字幕最新在线视频 美女被偷拍一区二区三区 免费高清av一区二区三区 欧美日韩不卡一二三区 三级有码在线观看视频 日本一区二区av电影 亚洲免费视频一区二区 日本黄色三级电影中文字幕 久久精品成人无码观看56 三级韩国日本在线观看 国产成人综合久久精品免费 色视频中文字幕一二三四 日韩一区二区高清看片 最近亚洲精品中文字幕 色婷婷在线观看免费视频 av网址手机在线免费观看 污色网站在线免费观看 在线观看网日本免费精品 中国一级久久久久久久久久久 亚洲一区二区三区和四区 欧美三级免费一区二区三区 后入肥臀母狗在线观看 九九线精品视频在线观看视频 欧美日韩电影免费在线观看 国产精品国产三级国产an不卡 天天操夜夜操狠狠狠操 国产精品久久久久久妇女 久久久亚洲av动漫 日韩免费精品一区二区三区 午夜色两性色视频免费网站 高中女厕偷拍一区二区三区 99热只有这里才有精品 日本一区二区三区四区在线播放 日本一区二区三区高清日韩 黄片影院免费在线观看 久久久久久亚洲精品专区 熟女丝袜偷窥自拍露脸亚洲 我要看亚洲黄色片一级 免费蜜桃视频全集在线播放 国产视频一区二区免费视频 亚洲视频一区二区三区在线 中国免费av一区二区 男女男在线精品免费观看 久久精品国产亚洲av蜜臀久久 精品国产九九九九九蜜桃 熟女少妇av一区二区三区 午夜亚洲精品视频网站 性色a√人人爽人人澡人人妻 国产伊人网在线播放视频 在线播放偷拍一区二区 狠狠爱婷婷网五月天久久 日本一区二区国产在线 国产人体综合亚洲欧美丁香花 日韩制服诱惑一区二区三区 精品午夜在线一区二区三区 日本精品久久久精品三18 中文字幕在线播放一区二区不卡 国产精品乱码久久久久毛片 亚洲国产成人久久精品不卡 日日摸夜夜添夜夜添无码国产 日本不卡一区更新二区 精品久久久久久国产av 国产精品国三级国暖暖 亚洲天堂精品一区入口 日韩电影在线播放中文字幕 国产主播区一区二在线观看 姐姐的朋友2中文字幕在线 激情av一区二区三区 日本综合a一区二区视频 国产福利亚洲精品精彩在线 不要啊啊啊啊在线观看观看 五月白白色视频在线观看 狠狠操夜夜操av网站 国产午夜精品亚洲精品国产 人妻中文字幕一区二区免费 欧美一区二区三区视屏 久青青草视频手机在线免费观看 不卡在线视频中文字幕 色综合久久鬼色综合久久 九九色在线视频免费观看 日韩一区二区三区有限公司 国产综合永久精品日韩鬼片 日韩欧美一区二区不卡看片 欧美一区二区三区桃花 国产日韩欧美一级电影 美女视频在线观看免费观看 成人久久久观看免费毛片 青青草视频免费在线观看视频 欧美日韩亚洲一区二区三区一 欧美日韩成人免费网站 国产精品无产久久久久久 欧美日韩一区二区综合另类 国产果冻一区二区日韩 日本欧美午夜福利视频 一区二区三区白浆在线观看网址 东京热加勒比日韩精品 五月天开心激情欧美日韩 国产精品天干天干在线观 中文字幕中文字幕在线中111 日韩国产成人精品视频 亚洲免费女女在线视频网站 日本国产精品视频一区 色婷婷在线视频免费观看 丰满的少妇一区二区三区 在线看中文字幕一区二区 亚洲国产高清在线视频 日本一区二区在线观看av 日韩精品欧美在线视频在线 国产激情视频网站在线观看 日韩中文字幕人妻视频网站小说 亚洲欧美综合一区二区91 精品主播在线一区二区 日本av一区二区视频 中文字幕在线免费h小视频 亚瑟av亚洲精品一区二区 aⅴ一区二区三区日本电影 日产一区日产2区免费 国产欧美日韩久久一区二区 亚洲中文字幕视频第一二区 亚洲欧美日韩手机在线 欧美黑人一区二区在线观看 国产国产人免费人成免费视频 熟女少妇免费视频网站观看 美女扒开腿露内裤免费看 国产欧美日韩综合另类 在线观看 国产一区二区三区 深夜福利免费看片网站 亚洲自拍偷拍色图综合 日本动漫精品久久久一区二区 欧美精品一区二区三区制服首页 久久不见久久久国产一区 日韩三级在线视频不卡 亚洲精品中文字幕一二 国产另类人妖在线观看 精品国产欧美日韩电影 日韩av中出一区二区三区 99re热在线观看视频最新版 国产精品美女三级视频 午夜影院在线观看电影 国产精品喷水一区二区三区 九九99九九在线精品视频 亚洲国产精品你懂的av 日本一区两区三区在线播放 日本东京久久精品一区 禁播的黄色片精品久久 欧美大香蕉一区二区三区 国产精品午夜日韩欧美 美腿丝袜高跟一区二区 韩国2023最新理论电影 成人国产日韩在线视频 精品免费一区二区三区视频 午夜视频在线观看视频观看 狠狠人妻久久久久久久久久久 精品一区二区久久蜜桃 人妻少妇喷水意淫诱惑 久久精品无人区一区二区三区 国产风骚美女啪啪免费看 久久伊人精品色婷婷国产 在线中文字幕亚洲精品 在线精品首页中文字幕亚洲 激情五月天丁香啪啪综合 日本不卡一区高清二区 久久精品久久久大学生 水蜜桃在线视频在线观看 蜜桃视频免费高清观看在线播放 日韩电影一区二区三区免费观看 在线视频日韩精品一区二区 麻豆视频在线观看成人 91av午夜一区二区 国产精品美女主播免费观看 中文字幕日本乱码在线 日日摸日日添夜夜爽97 九九久久只有精品视频 人成免费在线播放视频 69堂国产成人精品视频免费91 美女久久久高潮免费视频 麻豆视频_麻豆视频在线观看 日本精品一区二区视频在线观看 精品久久久久久久久入口 中文字幕不卡成人在线 视频一区二区三区欧美精品 日本一区二区在线看看 国产又色又爽又黄刺激蜜臀 999国产精品永久免费观看 青青草视频在线视频播放 99日韩精品在线观看 国产亚洲精品午夜理论片 狠狠爱婷婷网五月天久久 99久久精品午夜一区二区国产 亚洲中文字幕女优最新网址 97人妻人人澡人人添人人爽 在线亚洲精品国产97 亚洲欧美日韩电影一区二区 少妇一夜三次一区二区三 天堂的张望免费高清在线观看 精品久久久久久亚洲野狼 国产视频一区二区三区免费播放 欧美日韩精品视频免费下载 国产精品麻豆免费在线观看 国产精品久久久久久老熟女 国产精品毛片一区视频 国产一区二区三区不卡自拍 在线免费观看草草视频 成人性生交大片免费看中文视频 亚洲 自拍 校园 欧美 日韩 偷拍一区二区盗摄视频 欧美十八一区二区三区 国内揄拍国内精品对久久 亚洲精品欧洲久久婷婷99狠狠 日韩二区三区精品视频 日本在线一区二区三区视频观看 av成人久久精品一区二区 日韩一区二区精品网站 人妻少妇久久中中文字幕 一区二区三区最新中文字幕 日韩欧美国产精品综合嫩v 日韩精品久久精品三级 日本一区二区三区专线 日本中文字幕最新在线视频 在线不卡小视频播放网站 人人妻人人澡人人爽精品曰本 欧美视频免费一区二区三区 欧美老色奶506070 91青青草在线观看视频 日本午夜爱爱一区二区 国产一区二区黄色网页 亚洲视频第一页在线观看 中国免费av一区二区 亚洲精品视频1区2区 在线免费观看尤物视频 91精品国产长腿丝袜美女久久 国产亚洲av一区二区三区 精品国产91在线观看 精品熟女女同一区二区 久久国产精品亚洲精品 日韩中文不卡精品在线 最新日韩视频一区二区三区 日本三区不卡高清更新二区 成人欧美一区二区三区性视频 日本免费一区二区三区四区五六区 亚日韩精品一区二区三区 尹人大香蕉视频一区二区 牧村彩香一本精品久久久 99精品国产一区二区三区小说 青青草爽视频在线观看 欧美精品一区二区三区无广告 国产成人夜色在线视频观看 中文字幕不卡一区人妻在线 日韩一区二区三区天堂 91精品国产1区2区 亚洲欧美综合一区二区91 国产成人午夜91精品麻豆剧场 99精品69视频在线观看 成人免费看黄网站yyy456 美女黄页色视频在线观看网站 撒玛利亚女孩在线免费观看 国产日韩av一区二区 国产精品久久亚洲一区二区 亚洲欧美日韩免费一区二区 日本一区二区三区不卡视频 亚洲精品国产乱码不卡99 久久精品国产亚洲av嘘嘘 日韩少妇高潮视频免费看 午夜精品一区二区三区在视 国产夫妻精品一区久久久 我的极品女上司在线观看 日本一区二区免费欧美 欧美日韩亚洲另类在线观看 亚洲日本高清一区二区 亚洲精品视频在线一区二区 中文字幕结果国产精品 精品人妻伦一区二区三区久久 日韩高清不卡在线视频 成人免费在线观看黄色 av在线成人免费观看 中文字幕av二区三区人妻 国产三级视频在线观看网站 在线涩涩免费观看国产精品 成年人看的黄色小视频网站 国产精品熟女在线视频 国产成人高清亚洲一区91 国产亚洲曝欧美不卡精品 欧美精品一区二区在线免费观看 亚洲毛片网站视频在线播放 日本电影中文字幕国产精品 欧美大片特级特黄的免费的 91羞射短视频在线观看 日本刺激视频一区二区 国产欧美精品亚洲日本一区 人妻日韩精品综合一二三四 加勒比在线观看不卡视频 青青草原在线视频免费播放 亚洲国产污污黄无遮挡网站 欧美 日本 国内 一区 一级特片内射视频播放 日韩乱码一区二区蜜桃 亚洲成a人ⅴ欧美综合天堂 成人a毛片免费观看网站 国产主播区一区二在线观看 97人妻人人澡人人添人人爽 亚洲欧美一区二区三区孕 国产精品久久久久久久av三级 日本午夜天堂视频在线观看 亚洲一区二区三区免费不卡 日本麻豆一区二区三区视频 亚洲无人一区二区蜜桃 久久黄色成人精品网址 亚洲欧洲一二三区在线观看 日本一区二区精品电影 激情综合亚洲五月色婷婷 国产一区在线观看你懂得 日韩精品大片在线观看 久久精品国产23696 亚洲精品一区二区麻豆 精品中文字幕欧美区一区 日韩欧美人妻一区二区三区 中文字幕日本午夜在线观看 日本精品三级一区二区 日本人一区二区三区视频 最新在线中文字幕av不卡 免费人妖一区二区三区 亚洲午夜精品久久久天堂 国产精品日韩av在自线在免费 色偷偷久久久精品亚洲 亚洲乱码国产乱码精品 美女主播福利一区二区 日本黄色高清视频不卡一 一区在线播放观看视频 亚洲va视频一区二区三区 国产后入在线观看视频 精品国产99久久久宅男 精品国产亚洲 伊人成 日本特黄国产一级在线播放 99九九视频精彩在线 日产欧美日韩综合精品一区二区 99久久99久久久精品蜜桃 小泽玛利亚伦理在线观看 久久的精品久久的精品 亚洲天堂av一区免费 亚洲白嫩少妇在线喷水 亚洲欧美国产一区二区三区 亚洲日本欧美一区二区 99久久国产综合精品1 日韩精品一区二区不卡 综合久久久久国产日韩精品 五月婷婷六月丁香视频在线 我的极品女神在线观看 国产亚洲欧美日韩一区两区 亚洲国产女同在线观看 精品一区二区视频日本 国产区 欧美区 亚洲区 欧美a级片一区二区三区 日本一区二区三区女优在线 小泽玛利亚视频免费观看 国产中文字幕一区二区在线 久久熟女乱一区二区三区四区 欧美日韩久久精品一区二区 亚洲三级亚洲三级亚洲三级 亚洲图片欧洲图片综合图 99国产精品久久久久精品三级 亚洲中文欧美日韩一区 99热精品国产三级在线 国厂精品一区二区三区 欧美日本精品一区二区 在线观看v片免费视频 日韩中文字幕av一区二区三区 亚洲精品一区国产精品 欧美日本在线区一区二 国产精品久久毛片av大全 91香蕉国产精品日韩 中出后入视频在线观看 日本免费大片一区二区 欧美视频免费一区二区三区 国产精品国产国产av 亚洲av精品一区二区三区 国产综合精品久久久久一区 国产三级免费在线看片 91久久国产综合久久9 日韩三级hd久久精品 国产精品久久久久久久福利竹菊 在线日本高清日本免费 欧美日韩视频在线观看二区 久久精品亚洲欧美成人影院 中文字幕一区二区久久精品 亚洲国产精品无吗一区二区 亚洲精品一区二区三区蜜桃久 亚洲中文字幕视频第一二区 日韩美女综合一二三区 内射中入在线观看视频 av免费一区二区三区不卡 日本欧美国产一区二区三区 日韩制服国产精品一区 肉丝一区二区在线观看视频 国产精品经典三级一区 亚洲精品不卡伦理中文字幕 白白色发布的在线视频 日本在线视频播放一区二区 东北熟女国产精品自拍 国产熟女精品视频免费看 日本最新一区二区三区电影 亚洲熟妇av一区二区在线观看 亚洲国产成人精品女人久 亚洲综合精品国产av 国产一区二区精品黑丝 亚洲欧美一区二区三区日本 色噜噜日韩精品一区一二区 日韩欧美精品一区二区蜜臀 色老头在线播放在线观看 国产女主播福利一区在线观看 久久婷婷国产精品简爱av 麻豆国产在线观看激情 国产毛片人妻人伦人人澡 岛国av手机在线播放 成人伊人亚洲人综合网站 亚洲女同中文字幕网站 啊啊啊好舒服用力视频 成人性生交免费大片看好 少妇av一区二区三区va 国产在线三级免费观看 亚洲国产日韩综合中文字幕 国产三级免费在线看片 亚洲国产av午夜福利精品 欧美一区二区三区免费a级视频 久久精品视频日本免费 一区二区三区的视频在线观看 极品人妻一区二区三区视频 国产片在线免费观看自拍 日产日韩亚洲欧美综合在线 av麻豆免费观看大全 国产精品综合亚洲av 国产精品蜜臀一区二区三区经 中文字幕精品一区二区在线 色偷偷人人澡人人爽人人模 亚洲三级特黄大片在线看 国产91精品清纯白嫩 亚洲午夜久久久精品国产电影 亚洲夫妻性生活免费视频 精品午夜一区二区三区四区视频 亚洲精品免费视频久久 五月婷婷六月丁香伊人妞 夜夜嗨天堂精品一区二区 久久国产三级久久久久久 天噜啦精品亚洲最大看片 久久精品国产精品国产精品黄 97在线视频对对碰视频 大香蕉在线视频青青草 五月婷婷丁香六月在线 亚洲精品日韩一区二区在线 手机在线亚洲精品网站 国产毛片久久久内射精品 亚洲国产精品成人午夜在线观看 日本午夜视频一区国产 国产成人高清视频在线观看免费 国产精品成人中文字幕 请问那个网站有日韩毛片看 亚洲国产精品亚洲高清 美女扒开内裤让我捅的视频 日本精品在线观看福利 日韩av乱码一区二区 国产欧美亚洲精品第二区 青青操在线播放国产精品 亚洲国产福利电影一区二区三区 欧美日韩免费高清视频在线观看 狠狠干欧美亚洲第一成人 日韩 在线 一区二区 午夜视频在线观看免费日本 免费无遮挡18禁污网站 午夜五月天视频在线观看 97精品国产综合久久久免费 一本大道东京热加勒比 婷婷社区俺也来俺也去 亚洲噜噜av一区二区三区 激情欧美一区二区中文字幕有码 粉嫩性色一区二区三区av 2019中文字幕在线不卡 亚洲一区二区三区四区电影 免费人成网上在线观看网址 亚洲第一区蜜桃臀久久精品 色偷偷的亚洲男人的天堂 亚洲免费视频一区二区 亚洲精品成a人在线观看 国产精品三级在线观看 亚洲成人女孩毛片在线不卡 国产一区日韩精品二区 国产污黄网站在线观看 激情四射五月天综合网av 激情五月激情综合五月看花 欧美日韩国产一下老妇 六月婷婷国产精品综合 日韩电影中文版一区二区三区 蜜桃产品一区一区三区在线 国产精品三级在线观看 日韩欧美一二三区不卡 久久精品国产亚洲杨幂 日本熟妇人妻免费观看 天天躁日日躁狠狠躁免费麻豆 妖精视频在线视频一区二区三区 国产精品久久久久精品日 亚洲天堂av免费在线观看 欧美一区二区婷婷香蕉狠狠干 女厕偷拍网高清观看视频 粉嫩一区二区三区不卡av性色 在线看片免费人成视频a区 人妻少妇一区二区三区蜜臀精品 亚洲国产成人av毛片大全 97中文字幕精品一区二区三区 激情影院一级片免费观看 亚洲欧美日韩区一区二区三 亚洲欧美国产一本综合首页 第一页在线精品中文字幕 欧美视频日本视频在线观看 免费人成网上在线观看网址 日韩中文不卡精品在线 日韩视频在线免费观看 国产精品久久精品网站 91九色老熟女免费资源 国产密臀av在线一区尤物 精品国产自拍免费视频 97视频在线观看精品在线 少妇夜夜春夜夜爽试看视频 日本高清视频啪一区二区 人妻中文字幕日韩综合久久 日韩中文字幕在线观看电影 蜜臀精品久久久久久蜜臀 热久久美女精品天天吊色 加勒比日本东京热1区 欧美日本中文一区二区三区 女同在线观看一区二区 成人亚洲av二区三区久 亚洲国产欧美日韩精品另类 99久久国产综合精品麻豆推荐 正在播放国产又粗又长 男女无套免费视频网站 韩国三级hd中文字幕久久 97精品国产一二三区 国产精品96久久久久久a 免费在线观看的黄色av 丝袜美腿人妻ol诱人中出 99久久久精品免费国产 在线观看日韩精品电影 日韩av一区二区男人天堂 99久久国产综合精品1 国产密臀av在线一区尤物 日韩一区二区三区在线直播 亚洲精品中文字幕免费专区 精品少妇天天爽天天做 成人国产精品2021 99久久国产综合精品色 亚洲精品日韩精品欧美综合 亚洲国产一区二区a毛片妖精 中文字幕人妻乱码在线 久久精品国产欧美一区二区 亚洲爱情岛论坛自拍成人av 欧美一区二区三区十区 亚洲一区二区日韩精品在线观看 人人妻久久人人澡人人爽 亚洲国产精品无吗一区二区 黄页视频免费观看完整版大全 日本一区二区电影在线播放 国产精品亚洲在线播放 亚洲国产成人久久综合三区 五月天丁香啪啪激情综合 日本高清不卡一区二区爱片 蜜桃传媒视频在线免费 日本黑人乱偷人妻在线播放 亚洲番号在线播放一区二区三区 日韩亚洲国产综合αv高清 日韩视频在线看一二三 91丨九色丨国产熟女麻豆 欧美精品亚洲精品一区 国产精品一区白嫩在线观看 一区二区三区日本精品 国产欧美日韩一区二区免费 中文字幕一区二区三区网 日韩亚洲中文错码电影院 操操操天天操夜夜操狠狠操 亚洲激情一区二区三区在线 欧美中文字幕在线精品 国产精品久久久久久av 亚洲中文字幕人妻系列 久久草草视频在线观看 国产视频三级在线观看 在线小黄片视频免费播放 欧美亚洲综合另类国产情拍图 亚洲精品在线观看日本 青青草视频免费手机观看 国产精品va在线观看视色 精品国产综合区久久久久久蜜臀 在线观看免费无码a片视频 91精品国产92久久久久久 国产91色综合久久高清 亚洲欧美日韩欧美精品高潮 中国字幕在线看日韩激情 日韩精品有码中文字幕 亚洲电影中字一区二区 aⅴ一区二区三区日本电影 日韩激情电影一区二区三区 亚洲频道一区二区三区久久精品黄色片 精品国产3p一区二区三区 内射毛片内射国产夫妻 国产高清视频一区二区三区 五月天婷五月天综合网站 国产99久久精品一区 热久久美女精品天天吊色 亚洲欧美日韩视频二区 麻豆精品三级国产国语 国内精品国产成人国产一区 国产亚洲白白色发布免费 最新精品亚洲一区二区 激情文学一区二区国产区 久久亚洲中文字幕精品 亚洲欧美一区二区三区孕 国产剧情中文字幕一区二区 不卡一区二区高清在线 精品国产91久久久久久黄 欧美18禁久久一区久久 国产免费三级三级三级 九九视频在线免费播放 九九久久婷婷国产综合 国产精品av在线免费 污污免费国产精品视频 日本高清一区二区三区色 在线观看精品视频在线高清 久久夜色精品噜噜亚洲av 国产精品69精品一品二品 婷婷五月三级美女三级 婷婷激情五月天亚洲色图 亚洲一区二区精品精品视频 91福利久久一区二区蜜桃 国产刺激国产精品国产二区 久久夜色撩人精品国产小说 五月婷婷在线免费观看视频 韩国三级国产三级一区久久 日韩成人激情视频免费观看 一本色道久久综合亚洲精品蜜月 国产又大又长又粗又硬爽 久久久久久午夜福利电影 人妻中文字幕一区二区视频 国产精品亚洲va在线观看日本 日本高清不卡一区二区 国产美女视频网久久69 日本欧美一区二区在线 色香欲影天天影视综合网八点 亚洲美女主播一区二区 亚洲欧美人成视频一区在线 国产三级精品三级专区 亚洲成人精品久久久久久 国产午夜一区视频在线观看 在线免费看激情五月天电影 日韩电影网站一区二区三区 亚洲国产激情一区二区三区 熟女少妇a一区二区三区 国产不卡在线观看网址 在线欧美另类中文字幕的 高潮国产精品一区二区 日本一级a级黄免视频 中文字幕在线一区二区三区 日韩精品欧美激情第一页 精品少妇一区二区三区免费 丝袜美女美腿一区二区 欧美日韩国产一区二区综合 一区二区尤物区亚洲国产精品区 一道本久在线中文字幕 成人午夜视频免费看黄 亚洲小少妇一区二区三区 麻豆成年人视频在线观看 久久亚洲av午夜福利精品一区 亚洲一区欧美二区中文字幕 欧美日本国产成人在线观看 后入视频国产在线观看 亚洲国产精品一区二区久久爱 免费一区二区三区四区av 日韩一区二区视频免费看 亚洲国产成人精品女久久久久 少妇被搞高潮在线免费观看 精品视频一区二区三区水蜜桃 精品少妇高潮中出久久一区 日本大胆欧美一区二区 91麻豆精品福利在线观看 人人妻人人爽人人澡欧美 国产福利亚洲精品精彩在线 大香蕉av在线精品影院 精品国产av一区二区三区一 国产精品成人久久a级片 9久热这里只有精品粉嫩 我要看国产一级内射片 成人水蜜桃视频在线观看 日韩bd高清电影一区二区 在线观看女同一区二区 亚洲一区二区熟女av 欧美无砖专区一区二区三区 国产三级免费在线播放 麻豆国产高清精品国在线 国产激情刺激色区在线观看 日本不卡片一区一二区三区 黑丝翘臀后入在线观看 精品久久久久88久久久 姐姐的朋友2中文字幕在线 激情视频乱区二区三区 性色av一区二区三区影院 亚洲精品乱码国产妇女毛片 黄色在线播放不卡一区二区 日韩高清不卡在线视频 亚洲午夜福利视频免费 国产高颜值女主播在线 91草草视频在线观看 小美女玩逼逼视频 免费 亚洲国产福利成人一区二区 中文字幕一区二区中文 日本国产精品一区两区 国产伦精品一区二区三区欧 久久精品国产亚洲av忘忧草18 日被一区视频在线观看 国产视频一区二区免费视频 日本一区二区视频这里只有精品 久久久久久亚洲精品另类 日韩一区在线精品视频 男女草逼视频网站免费 国产精品综合三av在线电影 国产女人在线看国产女人 日韩一区二区三区一级电影 国产精品k频道网络视频 蜜桃视频在线观看免费 国产精品日本一区二区 欧美va一区二区三区 日韩高清一区二区三区视频 日韩精品在线电影中文字幕 综合久久av一区二区三区 一区二区三区四区中文字幕av 亚洲综合在线亚洲综合在线 色屁屁精品一区二区三区 天天干夜夜操2023 a国产欧美久久久不卡精品 国产精品亚洲一区二区视频 网址你懂的日韩精品中文字幕 亚洲色图日韩av在线播放 色欧美一区二区在线观看 精品夜欧美草草极品久亚洲码色 国产传媒三级在线观看 白白色发布视频在线播放 男女一区二区视频免费观看 欧美日韩视频小说图片专区 人人妻人人澡人人爽人人 黄片一区二区三区四区 日本电影一级一区二区 99久久精品午夜一区二 久久综合色——综合88 韩国欧美日本国产在线观看一区 99久久精品午夜一区二区三区 人人妻人人爽人人澡91 午夜亚洲国产精品一区 亚洲中国美女精品久久久 国产一区日韩二区欧美综合三区 收集最新中文国产中文字幕 九九在线视频在线视频 国产亚洲精品午夜理论片 国产三级大陆在线观看 日韩精品不卡一区二区 在线高清不卡免费视频 日韩美女av一区二区三区 美女人妻被中出中文字幕 欧美日韩国产成人ggg 91福利社区精品视频 日韩特黄特刺激午夜毛片 玖玖玖亚洲一区二区三区 美女一区二区三区四区av电影 日日噜噜夜夜狠狠免费 三上悠亚亚洲一区二区 av黄色成人在线观看 av中文字幕潮喷人妻系列 一区二区三区av蜜桃 亚洲成人精品一区免费 91精品国产99久久久久久红楼 夜夜嗨天堂精品一区二区 日韩亚洲欧美精品另类 亚洲精选一区二区三区久久 毛片av中文字幕一区二区三区 大陆欧美日韩一区二区三区 韩电影精品一区二区三区 少妇精品亚洲一区二区 日韩欧美好看的电视剧电影网站 日本一区二区免费啪视频 日韩中文字幕一区在线观看 水蜜桃一区二区视频在线 日本一区二区电影免费 青青草一区在线观看视频 国产成人免费自拍一区 精品高清一区二区三区人妖 久久99国产精品99久久 国产三级在线免费看片 夜色av一区二区三区涩涩 日本高清视频在线一区二区三区 日韩欧美国产亚洲一区 天天在线观看免费草草草草 欧美日韩一区二区高清免费 欧美成人精品三级网站在线观看 亚洲欧洲国产码专区在线观看 在线播放中文字幕一区二区三区 国产一品二品三品精品久久 亚洲瑟瑟午夜福利久久精品 在线观看av免费看永久观看 精品久久久久亚洲综合 日韩av毛片免费在线 久草手机在线视频观看 98超碰中文字幕久久精品 2020精品极品国产色在线不卡 国产精品三级国产专不 蜜臀av一区二区三区国产精品 国产精品久久自在自线 白带有黄色渣渣是什么问题 五月婷婷丁香六月激情综合 一本大道人妻中文字幕 中文久久精品一区二区三区 61精品人妻一区二区三区 激情影院在线观看免费 欧美日本国产成人在线观看 色偷偷男人天堂亚洲天堂 久久精品网站免费观看 五月天综合视频在线观看 99久在线观看免费观看 国产又粗又长又黄的视频 亚洲欧美日韩精品专区52 天天操夜夜操夜夜操夜夜操a 亚洲av人人妻综合网 国产精品97在线观看 国内外精品成人免费视频 亚洲欧美久久精品一区二 国产三级在线观看中字 三级国产三级视频在线观看 日韩精品久久久久久免费视频 人妻中文字幕一区二区视频 欧美日韩久一区二区精品 亚洲一区二区电影影院 国产精品无av码在线观看 日韩精品一区二区亚洲 日本一区二区三区免费 国产黄污网站在线观看 女人露出尿口让男人捅爽 久久国产免费高清伦理片 国产精品亚洲欧美另类一区二区 日本大奶人妻一区二区 蜜桃狠狠综合久久av一区二区 综合午夜视频一区二区三区 国产高清在线一区二区 日日骚亚洲欧美日韩综合一区 亚洲中文字幕视频第一二区 中文字幕乱码人妻久久精品 亚洲精品国产精品乱码三区 欧美精品一区二区日韩 亚洲专区国产高清日韩三级 在线观看免费人成视频国产 日韩成人中文字幕专区 亚洲伦理精品一区二区三区 91麻豆产精品久久久久久 青青草原在线视频在线观看 亚洲欧美综合精品一区二区 国产精品午夜日韩欧美 日本熟妇的诱惑在线观看 欧美日韩在线一区二区播放 少妇一晚三次一区二区三区 欧美同性恋一区二区| 色爱区综合激情五月| 亚洲自拍偷拍第十页| 国产区高清在线一区二区三区| 亚洲午夜一二三熟女| 久操在线视频免费观看| 乱荡一区二区三区视频| 国产主播网站在线观看| 婷婷九月在线观看视频| 多毛老熟妇在线视频| 九九热这里只有精品视频网站| 91福利网址在线观看| 污污一区二区在线观看| 日韩精品一在线观看| 在线在线十八禁视频| 久久久国产成人a视频| av天堂成人在线电影| 欧美日韩国内在线视频| 亚洲av影院影视天堂| 精品久久婷婷免费视频| 国产又大又长又粗又爽视频免费观看| 日本特殊的精油按摩在线播放| 亚洲av综合一区二区三在线播 | 美腿丝袜av+中文字幕| 国产AV人人夜夜澡人人爽小说| 成人免费在线大片日韩| 精品国产丝袜在线拍| 最新精品亚洲经典中文中出视频| 91精品一区在线观看| 丝袜高跟内射丝袜高跟| 亚洲人妻av资源网| 国产精品丝袜一二三| 欧美黑人视频与另类| 中文字幕精品亚洲无线码一区 | 亚洲日本岛国动作片在线观看| 开心快乐激情五月天| 色男人亚洲天堂社区| 亚洲成人激情小说网| 欧美的性高清一区二区| 亚洲中文字幕在线av| 亚洲色图色欧美偷拍| 国产清纯av一区二区| 看一区二区三区黄色| 久久久久久久久久久久久12p| 人妻蜜桃一区二区三区| 黄色av成人免费网站| 亚洲欧美日韩国产中文| 成人不卡av在线观看| 亚洲欧洲国产精品久久久蜜臀| 少妇裸体做爰高潮片| 亚洲无精品一区二区在线观看| 日韩av中文字幕在线播放网| 日本欧美一区二区东京| 激情小说欧美电影亚洲| 91青娱乐在线视频观看| 欧美日韩中国一区二区| 麻豆人妻少妇av无码中文字幕| 亚洲婷婷丁香综合网| 老司机免费高清视频| 亚洲一区二区手机在线| 免费高清日本一区二区三区视频| 伊人久久大香色综合| 日韩av成人精品久久| 亚洲av调教捆绑一区二区麻豆| 色蜜桃视频免费观看| 看一区二区三区黄色| 丁香妞久久激情五月天| ...二区三区久久精品| 黄色免费电影二区三区| 欧美α片无限看在线观看免费| 男人干女人能看到小穴的视频| 国产网红主播一区二区| 日本成人在线你懂的| 美女性爽视频国产免费APP | 哈哈操电影在线观看| 九九热精品官网视频| 日韩在线观看视频91| 欧美在线天堂一区二区| 美女裸体啪啪无遮挡免费观看| 波多野结衣中文字幕一区二区三区| 色婷婷久久综合网站| 神马欧美一区二区三区| 亚洲精品熟女国产多毛| 男人天堂视频在线官网| 欧美亚洲另类二区在线| 国产视频青青青在线播放| 成人黄视频免费观看| 欧美α片无限看在线观看免费| 日韩爱爱一级免费视频| 在线免费观看日本网址| 另类欧美日韩国产专区| 日本中文字幕三级视频| 成人免费在线网站视频| 日本剧情短片在线播放| 免费又黄又爽一区二区色| 哪里可以看黄色片子| 花花草草寻亲记全集在线观看| 日本japanese丰满毛多| 在线在线十八禁视频| 日本黄色xxx视频| 91自拍网在线播放| 欧美日韩国内在线视频| 欧洲日本国产一区二区| 五月天网站在线播放| 少妇裸体做爰高潮片| 亚洲色图色欧美偷拍| 精品久久婷婷免费视频| 国产精品免费拍视频| 日本成人性生活免费看| av网站在线天天有| 亚洲一区二区三区久久久久久久 | 精品人妻专区在线视频| 亚洲人色婷婷成人网| 亚洲国产成人精品女人久久久久 | 中文字幕第8页在线| 黄色的美女视频网站| 中文字幕 亚洲 欧洲| 国产av 天堂亚洲| 久久国产亚洲精选av| 生活中的玛丽k8经典网中文| 青春草在线精品视频| 亚洲日本中文字幕人妻| 欧美日韩亚洲中文另类| 国产情侣在线不卡视频| 人妻大香蕉欧美在线| 国产av超碰碰超爽| 欧美成人日韩在线观看| 中文字幕日本免费在线| 女同久久另类69精品| 古代女子对男子的尊称| 天天抠逼夜夜操美女| 日日夜夜精选免费观看| 成人午夜激情在线观看| 男的舔女的下面视频在线播放| 美女视频都是黄色的| 日本欧美一区二区东京| 青春草在线精品视频| 欧美黑人视频与另类| 性生活各种姿势视频| 国产精品丝袜熟女系列| 欧美色一区二区三区| 亚洲av的国产天堂av在线| 日韩欧美国产操逼视频| 日韩欧美一区二区不卡| 人妻内射视频免费看| av电影在线天堂首页| 日本熟妇乱人视频在线| 日本剧情短片在线播放| 好看的国产天堂av| 亚洲av无码一区二区三区四区| 精品久久久久免费成人码动漫| 欧美与日韩性生活片| 人妻制服丝袜步兵在线| 在线看黄色av网站| 久久久青草视频社区| 日韩av中文字幕在线播放网| 操美女大嫩逼九九九九九九九九| 国产高清毛片av在线| 蜜桃臀福利视频导航| 亚洲国产中文字幕乱| 国产在线观看91一区二区三区| 偷窥学校女厕撒尿BBBBB| 午夜精品美女久久久久| 日本邻居少妇人妻p| 国产精品免费拍视频| 亚洲精品亚洲成人网| 日本大尺度做爰吃奶| 日本夫妻性生活视频| 污污污免费在线播放| 日日夜夜精选免费观看| 97视频碰在线观看| 午夜精品人妻久久久| 在线免费观看日本网址| 黄色激情视频一级人妻| 99国产美女操逼视频| 人妻在线播放中文字幕| 中文一区二区三区在线观看视频| 青青视频在线免费看| 日本不卡一区二区免费在线观看| 男人的天堂国产av一区二区三区 | 情色小说在线免费看| 日韩一区二区三区色| 日夜啪啪一区二区三区| 99国产精品欲av麻| 人妻制服丝袜步兵在线| 人妻中文字幕在线观看| 在线免费观看日本网址| 国产高清毛片av在线| 久久久精品人妻一区二区三区漫画| 边操逼边打电话视频| 插入骚货视频在线观看| 国产床戏视频免费看| 午夜精品一区二区三区在线观看| 国产精品丝袜熟女系列| 激情国产丝袜激情丝袜| 伦理激情麻豆国产一区| 中文字幕日本免费在线| 在线日韩欧美一区二区| 一区二区青青草av| 亚洲最大的男人的天堂| 日本第一毛片东京热| 制服丝袜 一区二区| 中文字幕一区二区三区不卡日日| 亚洲无遮挡操逼视频| 精品99久久久久久| 日本高清高色视频免费| 欧美的性高清一区二区| 男人干女人能看到小穴的视频| 99热6免费在线观看| 成人免费高清视频在线| 亚洲人妻激情视频在线| 巨乳少妇av中文字幕| 日韩欧美一区二区不卡| 精品少妇人妻av免费一区二区| 日本免费观看视频在线| 精品人妻专区在线视频| 成人不卡av在线观看| 亚洲av综合一区二区三在线播| 亚洲狠狠婷婷综合久久| 操在线免费视频观看| 在线看黄色av网站| 日韩欧美国产亚洲在线| 亚洲日本中文字幕人妻| 亚洲人妻有码高清在线| 77777日本欧美在线观看| 日韩特黄免费在线观看| 啪一啪天天操夜夜爽| 日韩激情一区二区三区四区五区| 亚洲日本中文字幕大| 熟女淫一区二区三区| 国产高清日韩精品在线| 一区二区三区偷拍女厕| 日本欧美一区二区东京| 白筒袜嫩萝双腿之间乳白液体| 亚洲中文字幕永不卡| 美女性爽视频国产免费APP| 狠狠插狠狠操狠狠干| 成人自拍视频免费在线| 第一区av中文字幕| 花花草草寻亲记全集在线观看| 国产av 天堂亚洲| 日本japanese丰满多毛| 日本大尺度做爰吃奶| 中日韩中文字幕av| 国产粉嫩嫩06在线正在播放。 | 黄色大片在线免费看| 国产亚洲综合777| 久操网视频在线观看| 插逼视频双插洞国产操逼插洞| 人妻少中文系列先锋影音网站| 美女视频都是黄色的| 日本剧情短片在线播放| 国产日韩欧美啊啊啊| 哈哈操电影在线观看| 日本欧美国产中文字幕| 亚洲精品熟女国产多毛| 久久久久久亚洲国产精品一区二区 | 女性阴道分泌物是黄色的| 亚洲欧美日韩另类综合| 张开你的双腿让我进入| 久久久成人综合亚洲欧洲精品| 熟妇女人妻丰满少妇中文字幕性生活| 欧美日韩国产精品1卡| 开心快乐激情五月天| 国产免费激情床戏视频| 亚洲色图色欧美偷拍| 小福利合集午夜青青草| 麻麻张开腿让我爽了| 男人的天堂在线网站| 午夜频道成人在线91| 成人国产免费久久视频| 中文一区二区三区在线观看视频| 97起碰人妻免费视频| 综合专区91久久精品| 人妻一本久道久久综合久久鬼色 | 国产成人啪精品午夜在线播放| 色av中文字幕在线| 伊人久久大香色综合| 国产av我要操死你| 黄色在线看免费观看| 国产办公室黑色丝袜在线播放| 精品99久久久久久| 图片区自拍区欧美日韩| 一区二区三区不卡免费视频网站 | 亚洲午夜精品aaa| 亚洲av迷一区二区| 欧美精品蜜桃在线观看| 亚洲av无乱一区二区三区性色| 男人干女人能看到小穴的视频| 美熟女一区二区三区| 极品馒头一线天粉嫩在线观看| 国产av超碰碰超爽| 在线日韩欧美一区二区| 亚洲精品中文字幕乱码| 爆操日本老妇女b506070| 2019中文字幕久久| 丰满老熟妇好大bbbbb四p | 日韩高清无吗在线观看| 黄色的美女视频网站| 日韩精品中文字幕不卡| 熟妇女人妻丰满少妇中文字幕性生活| 人妻オナニー中文字幕| 日韩熟女人妻一区二区| 久草视频在线观看1| 探花约了个丰满少妇| 欧美的性高清一区二区| 高清不卡中文字幕av| 成人午夜激情在线观看| 国产饥渴熟女91专区| 国精品一区二区在线| 污污污免费在线播放| 日韩在线观看视频91| 制服丝袜 一区二区| 99热6免费在线观看| 激情小说欧美电影亚洲| 欧美日韩三级久久久久| 亚洲成人午夜精品电影| 幼女网站在线免费观看| 97视频碰在线观看| 日本性生活免费视频| 色偷偷噜噜噜亚洲男人| 大香蕉加勒比东京热| 中文一区不卡字幕在线| 男人的天堂啊啊啊啊| 天堂网日韩一区二区三区四区| 男女做那个的视频播放| 亚洲av调教捆绑一区二区麻豆| 91精品国产手机在线| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 91精品一区在线观看| 少妇午夜极品免费视频| 国产午夜免费啪啪啪| 日本免费观看视频在线| 91麻豆手机福利导航在线视频| 在线观看免费欧美精品| 青青草视频网址入口| 久久国产欧美人人精品| 国产午夜免费啪啪啪| 男生小鸡鸡插女生逼| 亚洲av的国产天堂av在线| 免费的十八禁漫画网站| 人妻中文字幕在线观看| 亚洲男男av在线观看| 久草视频在线观看1| 日韩在线观看视频91| 国产无套内射小骚货| 男人的天堂在线网站| 国产日韩欧美啊啊啊| 成人免费高清视频在线| 久久久久久久久久久久久12p| 尤物短剧免费观看全集| av电影在线观看网址| 日本视频三区在线播放| 操人妻在线免费观看| 伊人小美女操逼视频| 欧美精品国产精品综合| 女同一区二区三区四区| 日韩一区二区三区色| 污污污免费在线播放| 日本成人性生活免费看| 久久观看视频青青草| 欧美中文字幕中出人妻| 男人天堂视频在线官网| 91在线观看视频网| 免费在线不卡av观看| 九九热最新地址在线| 人妻内射视频免费看| 又大又长又粗又黄国产| 精品国产一区二区三区AV色诱| 国产夜色精品一区二区在线观看| 午夜剧场在线观看高清| 亚洲欧美不卡高清在线| 经典国产对白乱子伦精品视频| 开心快乐激情五月天| 激情五月天综合激情网| av真人青青小草一区二区欧美| 真人大鸡巴操大屁股国语国语| 国产又色又爽又刺激在线观看| 91自拍网在线播放| av电影在线天堂首页| 日韩激情一区二区三区四区五区| 国产激情福利在线视频| 经典国产对白乱子伦精品视频| 女人扒开自已的裤子让男人桶| 麻豆人妻少妇av无码中文字幕| 人妻オナニー中文字幕| 欧美区一区二区在线| 日韩一级黄色小视频| 久久不见久久见免费视频6无删减| 日韩av中文字幕在线播放网| 久久久少妇一区二区三区电影| 黄色激情四射在线观看| 成人自拍视频免费在线| 看全黄大片视频不卡| 欧美激情五月综合啪啪| 插逼视频双插洞国产操逼插洞| VODAFONEWIFI巨大黑| 帅哥在线免费观看大鸡鸡| 在线日韩欧美一区二区| 色蜜桃视频免费观看| 日本大乳高潮视频在线观看调教| 久久久久国产精品午夜| 国产人成中文字幕| 日韩福利视频导航网站| 伊人春色色偷偷久久久| 国产情侣在线不卡视频| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 欧美日韩亚洲另类图片| 亚洲av的国产天堂av在线| 天堂网日韩一区二区三区四区| 成人在线不卡av电影| 亚洲2017男人天堂| 久操在线视频免费观看| 久久不见久久见免费视频1′| 成人一区二区不卡国产| 免费看啪啪国产网站| 男女做爰刺激短视频| 插p视频免费在线观看| 国内精品伊人久久久久| 欧美中文字幕中出人妻| 日本第一毛片东京热| 这里都是精品中文字幕| 日本一区高清免费在线| 国内精品伊人久久久久| 99国产精品欲av麻| 国产五码在线观看一区二区三区 | 少妇精品视频久久久久久久久| 日韩成人在线免费电影| 偷窥学校女厕撒尿BBBBB| 午夜精品一区二区三区在线观看| 日韩一级特黄高清免费| 一区二区三区四区五区电影网| 在线观看成人字幕吗| 男女午夜大片在线观看| 国产午夜免费啪啪啪| 全是大胸的日本电影| 国产欧美日韩高清专区手机版| 国内自拍av 性网| 日韩成人av一二区| 最新老熟女av导航| 日本中文字幕人妻日韩| 欧美日韩国产一级高清| 欧美精品国产精品综合| 91成人在线小视频| 欧美色网站一区二区三区| 国内精品久久久久久一区二区| 欧美 日韩 在线不卡| 国产亚洲av久久久| 超碰在线免费人人妻| 试婚99天视频免费完整版观看| 草莓视频免费视频大全| 亚洲中文字幕在线av| 中文字幕水蜜桃4免费高清视频| 九九热精品官网视频| 美日韩美女操逼视频| 男女一起努力奋斗视频| 东京热免费视频精品| 国内自拍av 性网| 国产人成中文字幕| 人妻内射视频免费看| 插p视频免费在线观看| 国产夫妻性生活在线| 在线观看成人字幕吗| 欧美二区三区在线观看| 国产日韩欧美mv高清| 午夜羞涩视频在线观看| 日本网址免费中文在线| 日本大尺度做爰吃奶| 香蕉多少片叶子结果| 无码少妇一区二区三区浪潮AV| 黄色激情视频一级人妻| 国产亚洲av久久久| 男的舔女的下面视频在线播放| 欧美日韩亚洲中文另类| 男人对女人下部猛插免费视频| 精品国产乱码久久久久久婷婷| 一日本道在线观看.| 91自拍网在线播放| 国产区av中文字幕在线观看| 伊人网在线视频少妇观看亚洲| 日本巨黄泡妞视频免费| 男人干女人能看到小穴的视频 | 久久久久精品亚洲av| 日韩欧美熟女资源一区| 人妻中文字幕在线观看| 亚洲日本中文字幕人妻| 欧区一区二区三区人妻| 能免费看污视频的网站| 开心快乐激情五月天| 国产熟女一区二区三区五月婷小说 | 国产高清伦理在线视频| 日日夜夜精选免费视频| 国精品一区二区在线| av电影在线天堂首页| 男人对女人下部猛插免费视频| 亚洲一区二区手机在线| 国产一区二区五月婷婷| 男人对女人下部猛插免费视频| 亚洲人色婷婷成人网| 国产高清毛片av在线| 午夜精品1区2区3区| 经典国产对白乱子伦精品视频 | 亚洲免费a在线观看| 中出人妻少妇视频在线| 欧美精品蜜桃在线观看| 在线看黄色av网站| 99国产美女操逼视频| 免费看啪啪国产网站| 日韩成人av一二区| 第一区av中文字幕| 狠狠插狠狠操狠狠干| 亚洲午夜一二三熟女| 九九热精品官网视频| 在线免费观看嘿咻视频 | 五月情综合网站久久| 精品99久久久久久| 18禁美女露胸网站| 最近日韩一区二区三区四区av| 青青青国产手线观看视 | 亚洲色图自拍偷拍欧美| 开心快乐激情五月天| 国产免费激情床戏视频| 精品96久久久久久中文字幕无| 日本一区二区三区免费小视频| 97起碰人妻免费视频| 亚洲日本岛国动作片在线观看| 伊人久久大香色综合| 中文一区不卡字幕在线| 巨大欧美黑人xxxxbbbb| 少妇裸体做爰高潮片| 久久国产亚洲精选av| 久久久亚洲熟妇熟网站| 97起碰人妻免费视频| 日本japanese丰满多毛| 亚洲一区二区三区久久久久久久 | 18禁美女露胸网站| 91久久九色爽妇网| 18禁成人在线观看| 亚洲中文字幕五月婷婷| 亚洲欧美不卡高清在线| 人妻熟女在线观看的| 台湾佬中文一区二区| 美女操逼视频到高潮| 日本熟妇色在线图片| 日韩福利视频导航网站| 午夜动漫福利视频在线| 边操逼边打电话视频| 久久久免费专区蜜桃| 黄色大片在线免费看| 中文字幕精品亚洲熟女| 插逼视频双插洞国产操逼插洞 | 久久久久av性天堂| 欧美日韩国内在线视频| 亚洲欧美制服另类在线| 生活中的玛丽k8经典网中文| 亚洲av综合一区二区三在线播| 操人妻在线免费观看| 东北风流少妇高潮大叫| 操美女大嫩逼九九九九九九九九| 情色小说在线免费看| 亚洲爱情侣自拍品质| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 欧美孕交在线视频观看| 欧美的性高清一区二区| 欧洲日本国产一区二区| 欧美日韩中国一区二区| 日本夫妻性生活视频| 图片区自拍区欧美日韩| 无码人妻丰满熟妇区毛片18| 亚洲一区二区三区久久久久久久 | 人妻オナニー中文字幕| 欧美熟妇brazzers厨房| 午夜羞涩视频在线观看| 国产网红主播一区二区| 熟女淫一区二区三区| 幼女网站在线免费观看| 免费日韩成人在线视频| 一二三四区中文在线视频| 一二三四视频免费在线| 性生活各种姿势视频| 少妇被无套内射久久久| 日韩欧美熟女资源一区| 熟女视频一区二区中文| 人妻少中文系列先锋影音网站| 女同久久另类69精品| 国内一区二区三区精品| 哪里可以看欧美黄片| 成人在线不卡av电影| 成人操逼在线观看视频| 久久国产亚洲精选av| 日韩国av中文字幕一区二区| 青春草av在线免费观看| 色男人亚洲天堂社区| 亚洲中文字幕无码久久久久久久久| 中文字幕一区二区三区在线免费| 偷窥学校女厕撒尿BBBBB| 电工三级考试多少钱| 中文字幕水蜜桃4免费高清视频| 男人对女人下部猛插免费视频| 成人国产免费久久视频| 中文字幕av热热热| 国产亚洲综合777| 中文字幕精品亚洲无线码一区 | 丁香妞久久激情五月天| 国产无套白浆一区二区视频电视剧 | 亚洲AV无码成人精品区一本二| 日韩欧美熟女资源一区| 手机福利看片永久日韩| 日韩欧美熟女资源一区| 日本伊人久久综合网| 全是大胸的日本电影| 国产一级黄色片自拍| 天堂执法者亚洲帅哥| 欧美精品蜜桃在线观看| 欧美视频播放一区二区| 欧美日韩中国一区二区| 青青青国产手线观看视| 欧美色网站一区二区三区| 国产性一交一乱一伦一色一情| 成人午夜激情在线观看| 午夜频道成人在线91| 亚洲国产成人精品女人久久久久| 天天摸日日干夜夜看| 日韩中文字幕人妻有码| 免费啪啪视频午夜影视| 亚洲视频在线观看久久 | 日本熟妇色在线图片| 亚洲狠狠婷婷综合久久| jizz女人高潮喷水一区二区| 国产日韩欧美成人免费| 国产高清伦理在线视频| 国产区av中文字幕在线观看 | 在线在线十八禁视频| 日韩三级黄色免费网站| 看免费操美女小骚逼视频| 午夜精品视频一区在线| 无码一区二区三区爆白浆久久| 久操视频这里有精品| 欧美黑人视频与另类| 亚洲天堂成人在线一区| 99热6免费在线观看| 亚洲色图在线观看视频一区二区 | 日韩女同一区二区三区| 欧美精品啪啪视频观看| 日本亚洲欧美日韩工程| 美女张开腿男人桶到爽视频国产| 日韩精品福利电影网| 成都4片p完整版视频久久精品| 操人妻在线免费观看| 亚洲无精品一区二区在线观看| 久久嫩草人妻少妇av| 帅哥在线免费观看大鸡鸡 | 看免费操美女小骚逼视频| 亚洲欧美不卡高清在线| 18禁韩漫在线免费看| 日韩欧美国产操逼视频| 国产亚洲成av人片在线观看| 最新精品亚洲经典中文中出视频| 男人的天堂在线网站| 久久久久久久久久久久久12p| 极品馒头一线天粉嫩在线观看| 亚洲精品乱码中文字幕| 欧美精品一级黄色带| 亚洲爱情侣自拍品质| 日本家庭午夜激情在线 | 九九热最新网址给我| 美女网站黄免费看91| 亚洲成人午夜精品电影| 国产成人精选在线不卡| 亚洲精品中文字幕乱码| y成人亚洲香蕉av| 欧美同性恋一区二区| 成人在线播放视频网站| 美女精品国产999| 尤物短剧免费观看全集| 日韩中文字幕第一页| 欧美精品蜜桃在线观看| 老司机免费高清视频| 女人午夜色又刺激黄的视频免费| 国产又色又爽又刺激在线观看| 台湾妹子中文娱乐网天天久久综合| 欧美老熟妇黄色三级在线观看资源| 操我视频在线网站啊啊| 黄色免费电影二区三区| 免费在线播放不卡av| 久久精品 一区二区| 成人免费在线网站视频| 五月天网站在线播放| 国产精品久久久久久无码AV| 超碰在线免费人人妻| 亚洲中文字幕aⅴ在线| 亚洲狠狠婷婷综合久久| 中文字幕一区二区三区在线免费| 亚洲av无码一区二区三区四区| 一区二区三区四区五区电影网| 青青操在线视频观看| 18禁韩漫在线免费看| 亚洲午夜精品aaa| 操人妻在线免费观看| 久久亚洲堂色噜噜AV入口网站| 图片区自拍区欧美日韩| 欧区一区二区三区人妻| 18禁成人动漫下载| 人妻av无码系列一区二区三区| 成年免费大片黄在线观看↗火| 天天谢天天操天天日| 成人免费无码精品国产电影在线| 亚洲午夜精品福利影院| 77777日本欧美在线观看| 蜜桃视频在线观看二区| 日本放荡的熟妇在线| 操在线免费视频观看| 91自拍网在线播放| 18禁美女露胸网站| 日本japanese丰满毛多| 熟女淫一区二区三区| 加勒比成人精品视频| 久久精品国产91久久性色tv| ...二区三区久久精品| 国产无套内射小骚货| 亚洲欧美制服另类在线| 花花草草寻亲记全集在线观看 | 啪啪啪啪啪啪啪伦理片| 成人福利精品在线观看| 国产人成中文字幕| 日本高清高色视频免费| 色婷婷久久综合久综合| 麻豆人妻少妇av无码中文字幕| 秋霞中文字幕精品久久| 国产精品久久久入口| 十八禁动漫网站免费| 求在线免费观看av| 国产粉嫩嫩06在线正在播放。| 天天摸日日干夜夜看| 超碰在线免费人人妻| 久久嫩草人妻少妇av| 姐姐的诱惑中文字幕| 91在线精品老司机免费播放| 青青青国产手线观看视| 麻豆人妻少妇av无码中文字幕| 青青久久在线免费观看| 啪啪啪国产视频大全| 女人午夜色又刺激黄的视频免费| 91成人免费电影在线| 五月婷婷激情丁香久| 婷婷 丁香 自拍偷拍| 图片区自拍区欧美日韩| 熟妇女人妻丰满少妇中文字幕性生活| av小视频免费在线观看| 污污污免费在线播放| 美女隐私视频网站入口| 免费高清日本一区二区三区视频| 亚洲欧美制服另类在线| 在线观看成人字幕吗| 日本一区高清免费在线| 成年美女很黄的网站| 久久九九99热这里只有精品| 亚洲色图自拍偷拍欧美| 操美女大嫩逼九九九九九九九九| 午夜日韩在线免费视频| 天美传媒麻豆蜜桃飘香| 久久久久久久久久久久久12p| 五月天网站在线播放| 无人区一区二区精品| 久久久久久久久久久久久12p| 日本av毛片免费中文| 五月天网站在线播放| 国产成人精品日本亚洲专一区| 久久伊人激情综合网| 日本大尺度做爰吃奶| 久久亚洲欧美国产精品观看97 | 日韩成人av一二区| 国产综合一二三四区| 日本japanese丰满多毛| 日本性生活免费视频| 亚洲av迷一区二区| 亚洲爱情侣自拍品质| 少妇裸体做爰高潮片| 日本中文字幕人妻日韩| 人妻体内射精一二三区| 推荐丝袜高跟在线观看| 亚洲中文字幕永不卡| 东京热免费视频精品| 婷婷 丁香 自拍偷拍| 亚洲欧洲日本在线色| 欧美日韩中国一区二区| 久久精品国产久精久精| 日韩欧美国产亚洲在线| 台湾妹子中文娱乐网天天久久综合| 久操视频这里有精品| 五月天在线播放婷婷| 大香蕉这里只有精品| 中出人妻少妇视频在线| 又大又长又粗又黄国产| 99国产美女操逼视频| 秋霞中文字幕精品久久| 人妻熟妇av在线一区二区三区| 看一区二区三区黄色| 九九热最新网址给我| 一区二区三区不卡免费视频网站| 男女打扑克高清网站| 日本视频三区在线播放| 日本视频三区在线播放| 巨大欧美黑人xxxxbbbb| 中文字幕第8页在线| 大香蕉在线在线9观看| 极品馒头一线天粉嫩在线观看| 中文一区二区三区在线观看视频| 天天做天天爱天天大爽| 韩国性电影爱的色放| 欧美黄色网蜜桃视频| 小福利合集午夜青青草| 国产成人久久久久精品| 全是大胸的日本电影| 日本japanese丰满毛多| 成人在线播放视频网站| 日韩免费在线观看一区| 成人国产免费久久视频| 成人自拍视频免费在线| 日本欧美国产中文字幕| ...二区三区久久精品| 求在线免费观看av| 日本视频一二区三区| 人妻制服丝袜步兵在线| 国产日韩欧美啊啊啊| 国产高清伦理在线视频| ...二区三区久久精品| 国产av熟女网站导航| 日本视频三区在线播放|